操作步驟：產(chǎn)品僅用于科研

1：配制程序凍存液，放在室溫備用或放在4℃預(yù)冷

2：離心收集對數(shù)生長期的細(xì)胞（貼壁細(xì)胞消化下來離心，懸浮細(xì)胞直接離心，轉(zhuǎn)速1200rpm或250g，時間3min）

3：用配制好的凍存液重懸細(xì)胞，按照1~1.5mL/管分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標(biāo)記

4：凍存管放入凍存盒，凍存盒放入-80℃冰箱過夜（24h）

5：凍存管從凍存盒取出，轉(zhuǎn)移至液氮長期保存

產(chǎn)品名稱	生長特性	貨號
MDBK(BVDV-free)；牛腎細(xì)胞	貼壁生長	BJ-01X86392

細(xì)胞名稱 牛腎細(xì)胞；MDBK(BVDV-free)

形態(tài)特性  上皮細(xì)胞樣

生長特性 貼壁生長

特征特性  該細(xì)胞由中國藥品生物制品檢定所細(xì)胞室王佑春主任贈送。MDBK細(xì)胞對包括牛腺病毒、牛細(xì)小病毒、牛腹瀉病毒在內(nèi)的多種病毒敏感，可用于這些病毒的擴(kuò)增、檢測研究。

培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle＇s Balanced Salts)  10%FBS

傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代

傳代情況 C112

凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

處理辦法：

① 脫落的細(xì)胞進(jìn)行離心收集，并在離心管中消化。

② 仍然貼壁的細(xì)胞，按照常規(guī)方法加入胰酶或其他解離劑消化。

③ 再將消化好的脫落細(xì)胞和貼壁細(xì)胞混合，按比例接種到新的培養(yǎng)器皿中。

放入培養(yǎng)箱靜置2-4小時，若4小時后仍然沒有伸展，延長靜置時間。注意，過夜靜置時，需倒出部分培養(yǎng)基，留5-10mL在瓶中，瓶蓋擰松透氣，保持氣體交換（L15培養(yǎng)體系除外）。

操作步驟

1：從冰箱拿出無血清非程序凍存液，待用

2：離心收集對數(shù)生長期的細(xì)胞（貼壁細(xì)胞消化下來離心，懸浮細(xì)胞直接離心，轉(zhuǎn)速1200rpm或250g，時間3min）

3：棄上清，加入適量無血清非程序凍存液，重懸細(xì)胞

4：按照1~1.5mL/管的量分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標(biāo)記

5：將凍存管直接移入-80℃冰箱中，24h后轉(zhuǎn)移至液氮長期保存

細(xì)胞凍存液操作示意圖：

5-(1-Piperazinyl)benzofuran-2-carboxamide  中文名：  分子式：C13H15N3O2  度：98.0%  小鼠Ⅲ型前膠原肽elisa試劑盒   小鼠Ⅲ型前膠原肽試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠Ⅲ型前膠原肽試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠Ⅲ型前膠原肽試劑盒、小鼠Ⅲ型前膠原肽eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Vilazodone   中文名：鹽酸維拉唑酮  分子式：C26H28ClN5O2  度：98.0%  小鼠Ⅱ型膠原elisa試劑盒   小鼠Ⅱ型膠原試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠Ⅱ型膠原試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠Ⅱ型膠原試劑盒、小鼠Ⅱ型膠原eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  

2-Cyano-N-[4-(Trifluoromethyl)Phenyl]Acetamide  中文名：  分子式：C10H7F3N2O  度：98.0%  小鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA試劑盒  

Teriflunomide  中文名：特立氟胺  分子式：C12H9F3N2O2  度：98.0%  小鼠apelin12(AP12)ELISA試劑盒  

3-(3-Chloropropyl)-1,3-dihydro-7,8-dimethoxy-2H-3-benzazepin-2-one  中文名：  分子式：C15H18ClNO3  度：98.0%  小鼠8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒石英砂(AR,6-10目或2-3mm)  Sand  質(zhì)量規(guī)格：AR,6-10目或2-3mm 人幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)ELISA檢測試劑盒HumanHelicobacterpyloriIgM,Hp-IgMELISAKit 96T/48T

石英砂(AR,8-16目或1-2mm)  Sand  質(zhì)量規(guī)格：AR,8-16目或1-2mm 大鼠循環(huán)復(fù)合物(CIC)試劑盒 Rat circulating immune complex,CIC ELISA Kit

二氫銨(SP)  Ammonium phosphate monobasic  質(zhì)量規(guī)格：SP 英文名稱RatmajorhistocompatibilitycomplexELISAKit大鼠組織相容性復(fù)合物(MHC)規(guī)格：96T/48T

二甲基亞砜(光譜級，>99.9% (GC))  Dimethyl sulfoxide  質(zhì)量規(guī)格：光譜級，>99.9% (GC) 鈣離子膜通道鈣泵(F型ATP酶/線粒體、葉綠體)功能熒光檢測試劑盒20

N,N-二甲基乙酰胺(光譜級,≥99.8%(GC))  N-N-Dimethylacetamide  質(zhì)量規(guī)格：光譜級,≥99.8%(GC) ELISAKitLp-α人脂蛋白α規(guī)格：48T/96T

二甲基亞砜(ACS,光譜級)  Dimethyl sulfoxide  質(zhì)量規(guī)格：ACS,光譜級 小鼠細(xì)胞抗原75(LY75)ELISA試劑盒 ，英文名： LY75 ELISA Kit

乙二醇(光譜 ,≥99%)  Ethylene glycol  質(zhì)量規(guī)格：光譜 ,≥99% 人脂肪酶(Lipase)ELISA檢測試劑盒HumanLipaseELISAKit 96T/48T

甘油(for spectroscopy,≥99.5%)  Glycerol in water for HPLC verification  質(zhì)量規(guī)格：for spectroscopy,≥99.5% 大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)試劑盒 Rat Platelet Factor 4,PF-4 ELISA Kit

碳酸鋰(SP)  Lithium carbonate  質(zhì)量規(guī)格：SP 英文名稱RatmajorhistocompatibilitycomplexELISAKit大鼠組織相容性復(fù)合物(MHC)規(guī)格：96T/48T

新亞銅試劑鹽酸鹽一水合物(99%)  Neocuproine  monohydrate  質(zhì)量規(guī)格：0.99 鈣離子膜通道鈣泵PMCA(P型ATP酶/質(zhì)膜)功能熒光檢測試劑盒20己二酸二乙酯(>99.0%(GC))  Diethyl Adipate  質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC) 英文名稱HumanCCL1ELISAKit人CCL1規(guī)格：96T/48T

己二酸二異癸酯  Diisodecyl Adipate  質(zhì)量規(guī)格： 英文名稱HumanCCL20ELISAKit人CCL20規(guī)格：96T/48T

壬二酸雙(2-乙基己基)酯(>75.0%(GC))  Bis(2-ethylhexyl) Azelate  質(zhì)量規(guī)格：>75.0%(GC) 英文名稱HumanCCL21ELISAKi

MDBK(BVDV-free)；牛腎細(xì)胞細(xì)胞復(fù)蘇步驟：

1：水浴鍋預(yù)熱至37℃?zhèn)溆?

2：準(zhǔn)備15mL離心管，并向其中加入適量培養(yǎng)基待用

3：將細(xì)胞凍存管從-80℃冰箱或液氮中取出，放入PE手套中，迅速投入水浴鍋

4：用力搖晃凍存管，使其在1分鐘內(nèi)融化

5：用紙巾擦拭水漬，轉(zhuǎn)移至生物**柜。用移液槍吸取細(xì)胞懸液，緩慢滴加到步驟2中準(zhǔn)備好的離心管

6：1200rpm離心3分鐘

7：棄上清，用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，接種至新的無菌培養(yǎng)器皿中