細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
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產(chǎn)品名稱 |
生長特性 |
貨號 |
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pgsA-745；中國地鼠卵巢細(xì)胞－木糖基轉(zhuǎn)移酶I缺陷型 |
貼壁 |
BJ-01X86272 |
細(xì)胞名稱 中國地鼠卵巢細(xì)胞－木糖基轉(zhuǎn)移酶I缺陷型；pgsA-745
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁
特征特性 該細(xì)胞為木糖基轉(zhuǎn)移酶1缺陷型。
培養(yǎng)條件 F12K 10%FBS
傳代方法 1:4-1:5，每周換液2-3次
傳代情況
凍存條件 90%FBS+10%DMSO
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
Dihydroisotanshinone
I 中文名： 分子式：C18H14O3 度：98.0% 兔子Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒
4-Hydroxysapriparaquinone 中文名： 分子式：C20H26O4 度：% 兔子Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒
Phyllostine 中文名： 分子式：C7H6O4 度：98.5% 兔子Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISAKit
2-Methoxystypandrone 中文名： 分子式：C14H12O5 度：98.0% 兔子Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISAKit
Lapachol 中文名：拉帕醇 分子式： 度：98.0% 兔子Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISAKit單阿糖腺苷;阿糖腺苷單 ARA-AMP;Vidarabine monophosphate 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
Rat soluble cell differeiation aigen 30 ligand (sCD30L) ELISA Kit 大鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原30配體(sCD30L)ELISA試劑盒
α-萘黃酮 α-Naphthoflavone 質(zhì)量規(guī)格：>98%, 進(jìn)口 HumanNOD-likereceptor9,NLRELISAKit 人NOD樣受體(NLR)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
紫脲酸銨
Murexide 質(zhì)量規(guī)格：ACS Humanai-filaggrinaibody,AFAELISA試劑盒人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體(AFA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
鹽酸羥胺
Hydroxylammonium chloride 質(zhì)量規(guī)格：AR 植物精氨酸(arginine)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20
3,3'-二甲基聯(lián)萘胺
3,3'-Dimethylnaphthidine 質(zhì)量規(guī)格：>97%,進(jìn)分 HumanVitaminD，VDELISAKit人維生素D(VD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
金胺O
Auramine O 質(zhì)量規(guī)格：BS 小鼠甲狀旁腺素受體2(PTHR2)ELISA試劑盒 ，英文名： PTHR2 ELISA Kit
2,3-二巰基丙磺酸鈉
2,3-dimercapto-1-propanesulfonate 質(zhì)量規(guī)格：>98% 人甘膽酸(CG)ELISA檢測試劑盒Humancholyglycine,CGELISAKit 96T/48T
硫酸鈰銨
Ammonium ceric sulfate 質(zhì)量規(guī)格：AR,>98% 大鼠新喋呤試劑盒 Rat
Neopterin ELISA Kit
硫代乙酰胺
Thioacetamide 質(zhì)量規(guī)格：AR, ≥99.0% 英文名稱RatInsulinELISAKit大鼠胰島素(Insulin)ELISAKit規(guī)格：96T/48T
磺基羅丹明101
Sulforhodamine 101; Sulforhodamine 640 質(zhì)量規(guī)格：>97% 寡核苷酸探針非同位素AP化學(xué)發(fā)光法DNA南方雜交完全試劑盒5多巴胺鹽酸鹽 HPLC≥98% 20mg MTT比色法細(xì)胞繁殖測定試劑盒500
D葡萄糖醛酸 98% 100mg
Murashige&Skoog基礎(chǔ)培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
L（）巖藻糖 98% 20mg Murashige&Skoog完全培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
苯甲酸鈉 HPLC≥98% 250mg
MYC(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克
多菌靈 HPLC≥98% 250mg
MYC蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25
利福平 HPLC≥98% 100mg
MYC蛋白共沉淀分析試劑盒5
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
pgsA-745；中國地鼠卵巢細(xì)胞－木糖基轉(zhuǎn)移酶I缺陷型應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。