細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號(hào)12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
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產(chǎn)品名稱 |
生長特性 |
貨號(hào) |
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NRK；正常大鼠腎細(xì)胞 |
貼壁生長 |
BJ-01X86248 |
細(xì)胞名稱 正常大鼠腎細(xì)胞；NRK
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 NRK細(xì)胞系衍生自正常鼠腎組織，能在多種培養(yǎng)基中常規(guī)傳化。該細(xì)胞用于細(xì)胞毒性試驗(yàn)、生長效力測(cè)定，是評(píng)估的優(yōu)選細(xì)胞系。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C57
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
Marsdenoside
F 中文名： 分子式：C39H60O14 度：% 兔固（ALD）ELISA試劑盒
8,14-Epoxyergosta-4,22-diene-3,6-dione 中文名： 分子式：C28H40O3 度：% 兔去甲上腺素(NA)ELISA試劑盒
Schleicheol 1 中文名： 分子式：C30H52O2 度：% 兔去甲上腺素elisa試劑盒 兔去甲上腺素試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 兔去甲上腺素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔去甲上腺素試劑盒、兔去甲上腺素elisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
Uzarigenin
digitaloside 中文名： 分子式：C30H46O8 度：97.5% 兔前列腺素F2aelisa試劑盒 兔前列腺素F2a試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 兔前列腺素F2a試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔前列腺素F2a試劑盒、兔前列腺素F2a
elisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
Daturametelin I 中文名： 分子式：C34H48O10 度：93.0% 兔前列腺素E2elisa試劑盒 兔前列腺素E2試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 兔前列腺素E2試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔前列腺素E2試劑盒、兔前列腺素E2 elisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月?？傻乃?span lang="EN-US">(
美國進(jìn)口) Cortisone 質(zhì)量規(guī)格：>95%,美國進(jìn)口 大鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratdeoxypyridinoline,DPDELISAKit 96T/48T
柳胺酚,利膽酚(標(biāo)準(zhǔn)品) 2-Hydroxy-N-(4-hydroxyphenyl)-benzamide 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人超敏熱休克蛋白60(HSP-60)試劑盒 Human
Ula Sensitive Heat Shock Protein 60,HSP-60 ELISA Kit
柳胺酚,利膽酚 2-Hydroxy-N-(4-hydroxyphenyl)-benzamide 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
RatTestoterone,TELISAKit大鼠睪同(T)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
甲磺酸瑞波西汀
Reboxetine mesylate 質(zhì)量規(guī)格：>97% K-Ras鳥苷酸酶活性分析試劑盒6
酮色林,凱他色林 Ketanserin 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR PlaVitaminB12,VB12ELISA試劑盒植物維生素B12(VB12)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
酮色林,凱他色林(標(biāo)準(zhǔn)品)
Ketanserin 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶(MMP-8)ELISA試劑盒 ，英文名： MMP-8 ELISA Kit
章胺鹽酸鹽；正辛弗林
DL-Octopamine HCl 質(zhì)量規(guī)格：>98% 大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratcross-linkedC-telopeptidesofTypeⅠcollagen,CⅠCPELISAKit 96T/48T
舒林酸
Sulindac 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人超敏前列腺特異性抗原(PSA-U
S)試劑盒 Human Ula Sensitive Prostate Specific
Aigen,PSA U S ELISA Kit
舒林酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Sulindac 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 RatTGF-beta-inducibleearlyresponsegene-1,TIEG1ELISAKit大鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
托品酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Tropic acid 質(zhì)量規(guī)格：>98%
KSHV(KAPOSISARCOMA-ASSOCIATEDHERPESVIRUS)病毒標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒2蛋白激酶C（19-36）；蛋白激酶C選擇性抑制蛋白
Protein Kinase C (19-36);Protein Kinase C Selective Inhibitor
Protein 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 小鼠細(xì)胞外基質(zhì)蛋白1(ECM1)ELISA試劑盒 ，英文名： ECM1 ELISA Kit
蛋白激酶C（530-558） Protein Kinase C (530-558) 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 小鼠細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(ERK)ELISA試劑盒 ，英文名： ERK ELISA
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
NRK；正常大鼠腎細(xì)胞采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。