細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞；3D2
形態(tài)特性 母細(xì)胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 可產(chǎn)生單克隆抗體。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C25
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
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產(chǎn)品名稱 |
3D2；小鼠雜交瘤細(xì)胞 |
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生長特性 |
半貼壁生長 |
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貨號 |
BJ-01X86193 |
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
(S)-4-Benzyl-2-oxazolidinone 90719-32-7 中文名：(S)-4-芐基-2-噁唑烷酮 分子式：C10H11NO2
S-100蛋白 英文名稱：
S-100protein 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： S-100
1-Benzyl-1H-indazol-3-ol 2215-63-6 中文名：1-芐基-1H-吲唑-3-醇 分子式：C14H12N2O 四甲基化銨 100g
4-Benzyl
L-aspartate 2177-63-1 中文名：L-天冬氨酸-4-芐酯 分子式：C11H13NO4
TMA 500g
Bezafibrate 41859-67-0 中文名：苯扎貝特 分子式：C19H20ClNO4 四甲基聯(lián) 5g
Benzoyleneurea 86-96-4 中文名：亞苯甲?；?span lang="EN-US">
分子式：C8H6N2O2 TMB 1gV Lup-20(29)-en-28-oic acid, 3-[β-D-glucopyranosyl(1→4)[a-L-rhamnopyranosyl) (1→2)-a -L-arabinopyranosyl]oxy], (3β,4a)-) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱RatCytochromeCELISAKit大鼠細(xì)胞色素C(CytochromeC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
V Hederagenin 3-O-α-L-rhamnopyranosyl(1→2)-(β-D-glucopyranosyl(1→4))-α-L-arabinopyranoside 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 核酸氧化8-氧脫氧鳥苷(8-oxo-dG)高效液相色譜(HPLC)分析試劑盒20
GDC0994 GDC-0994 質(zhì)量規(guī)格：ERK1/2 抑制劑 ELISAKitHSA人血清白蛋白規(guī)格：48T/96T
氨三乙酸
Nitrilotriacetic acid 質(zhì)量規(guī)格：AR 小鼠環(huán)胍酸肽(CCP)ELISA試劑盒 ，英文名： CCP ELISA Kit
靈芝酸I(標(biāo)準(zhǔn)品) Ganoderic acid I 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 人2,3-二0酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA檢測試劑盒Human2,3-Disphosphoglycerate,2,3-DPGELISAKit
96T/48T
苦蘇花皂苷C
Cussosaponin C 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠維生素D2(VD2)試劑盒 Rat Vitamin D2,VD2 ELISA Kit
常春藤苷C
Hederacoside C 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱RatCytochromeCELISAKit大鼠細(xì)胞色素C(CytochromeC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Hederacolchiside
E Hederacolchiside E 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 核桃誘導(dǎo)(DKWJuglans)培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
3-O-β-D-葡萄糖( 1→3)- a -L-鼠李糖(1→2)- a-L-阿拉伯糖 齊墩果酸– 28-O-鼠李糖(1→4)葡萄糖(1→6)葡萄糖苷 V 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitHA人血凝素規(guī)格：48T/96T
3-O-b-D-葡萄糖( 1→4)-[ a -L-鼠李糖(1→2)]- a-L-阿拉伯糖 23-羥基羽扇豆20(29)-烯-28–酸- 28-O-鼠李糖(1→4)葡萄糖(1→6)葡萄糖苷 V 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠環(huán)孢素A(CsA)ELISA試劑盒 ，英文名： CsA ELISA Kit梣酮（標(biāo)準(zhǔn)品） Fraxinellone 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠封閉蛋白3(CLDN3)ELISA試劑盒 ，英文名： CLDN3 ELISA Kit
茶黃素(標(biāo)準(zhǔn)品) Theaflavin 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠輔肌動蛋白α2(ACTN2)ELISA試劑盒 ，英文名： ACTN2 ELISA Kit
茶黃素-3'-沒食子酸酯 Theaflavin-3'-gallate 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠復(fù)制啟動因子1(REPIN1)ELISA試劑盒 ，
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際進行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
3D2；小鼠雜交瘤細(xì)胞采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。