細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號(hào)12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
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產(chǎn)品名稱 |
生長(zhǎng)特性 |
貨號(hào) |
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2A1H1D1D4；小鼠雜交瘤細(xì)胞 |
半貼壁生長(zhǎng) |
BJ-01X86154 |
細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞；2A1H1D1D4
形態(tài)特性 母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性 可產(chǎn)生單克隆抗體。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C30
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
6-Hydroxyrubiadin 中文名：6-羥基甲基異茜草素 分子式：C15H10O5
Acetaldehydeoxime
6-Fluoro-3-(4-piperidinyl)-1,2-benzisoxazole 中文名： 分子式：C12H14ClFN2O 乙酰胺 100g
6-Deoxy-3-O-methyl-β-allopyranosyl(1→4)-β-cymaronic
acid δ-lactone 中文名： 分子式：C14H24O8
Acetamide
6-Chloroguanine
riboside 中文名：6-氯鳥嘌呤核苷 分子式：C10H12ClN5O4 乙脫氫酶（ALDH）試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣
6-Benzyloxypurine 中文名：6-芐氧基嘌呤 分子式：C12H10N4O 輔酶ⅡNADP(H)含量測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/24樣Thonningianin A HPLC≥98% 20mg 犬白介素1β(IL-1β)試劑盒 Dog Ierleukin 1β,IL-1β ELISA Kit
Tinnevellin
glucoside HPLC≥98% 20mg 英文名稱HumanAquaporin3ELISAKit人水通道蛋白3(AQP3)規(guī)格：96T/48T
TPI HPLC≥98% 20mg 大鼠αACTIN基因甲基化檢測(cè)試劑盒20
α波菜甾醇 HPLC≥98% 5mg
Ratlipoproteinlipase,LPLELISA試劑盒大鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
α菠甾醇OβD葡萄糖苷 HPLC≥98% 5mg 小鼠血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒 ，英文名： PAF ELISA Kit
α常春藤皂苷 HPLC≥98% 20mg 小鼠視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseRetinol-bindingprotein,RBPELISAKit
96T/48T
α倒捻子素 HPLC≥98% 20mg 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)試劑盒 Human
TIMP-4 ELISA Kit
α胡蘿卜素 HPLC≥98% 20mg
Ratcarbonicanhydrase,CAELISAKit大鼠酶(CA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
α蒎烯 GC≥95% 0.5mL
10%脫氧膽酸納(DeoxycholicAcid，salt)100毫升
α細(xì)辛腦 HPLC≥98% 100mg
Mousecalciumchannelblockers,CCBELISA試劑盒小鼠鈣通道阻滯劑(CCB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T香葉木素（標(biāo)準(zhǔn)品）
Diosmetin 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠胰島素受體底物2(IRS2)試劑盒 Rat insulin receptor subsate 2,IRS2 ELISA
Kit
金雀花堿,野靛堿 Cytisine 質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BR 大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA檢測(cè)試劑盒RatInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1ELISAKit 96T/48T
金雀花堿,野靛堿（標(biāo)準(zhǔn)品） Cytisine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
2A1H1D1D4；小鼠雜交瘤細(xì)胞采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。