細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
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產(chǎn)品名稱 |
生長特性 |
貨號 |
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B16；小鼠黑色素瘤細(xì)胞 |
貼壁生長 |
BJ-01X86144 |
細(xì)胞名稱 小鼠黑色素瘤細(xì)胞；B16
形態(tài)特性 梭形
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞源于C57BL/6J小鼠黑色素瘤，可以產(chǎn)生黑色素，同基因小鼠體內(nèi)移植可成瘤。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1：3傳代；3-4天一次
傳代情況 PN2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
Androstanolone
17-benzoate
Rosuvastain
Calcium 147098-20-2 中文名：瑞舒伐他汀鈣 分子式：C22H28FN3O6S 人纖溶抑制因子(TAFI)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human TAFI
(Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor) ELISA Kit
Ambrisentan 177036-94-1 中文名：安倍生坦 分子式：C22H22N2O4 人纖維蛋白(FBL)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
Human FBL (Fibrillarin) ELISA Kit
Propacetamol 66532-86-3 中文名：鹽酸丙帕他莫 分子式：C14H21ClN2O3 人生長受體(GHR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
Human GHR (Growth Hormone Receptor) ELISA Kit
Pirfenidone 53179-13-8 中文名：哌非尼酮 分子式：C12H11NO 人組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒萊苞迪甙D（標(biāo)準(zhǔn)品） Rebaudioside
D 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95.50%，標(biāo)準(zhǔn)品 RatUlasensitivityThyroxine,u-T4ELISAKit大鼠高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
老鸛草素（標(biāo)準(zhǔn)品）
Geraniin 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 NEUROG基因甲基化程度定量分析試劑盒盒20
酪醇(標(biāo)準(zhǔn)品) Tyrosol 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 PorcineHeatShockProtein20,HSP-20ELISA試劑盒豬熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
雷酚內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品）
Triptophenolide 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)ELISA 試劑盒
雷公藤紅素(標(biāo)準(zhǔn)品) Celastrol 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Rat immunoglobulin A (IgA) ELISA Kit 大鼠球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒
雷公藤甲素(標(biāo)準(zhǔn)品) Triptolide 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 humanProstaglandinE1,PG-E1ELISAKit 人前列腺素E1(PGE1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
雷公藤內(nèi)酯酮（標(biāo)準(zhǔn)品）
Triptonide 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Humanai-parotidductaibodyELISA試劑盒人抗腮腺管抗體(ai-parotidductAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
類葉升麻苷,毛蕊花糖苷（標(biāo)準(zhǔn)品） Acteoside 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 植物細(xì)胞壁束縛酸性蔗糖轉(zhuǎn)化酶(acidinvease)活性比色法定量檢測試劑盒(胞壁)20
利卡靈-B(標(biāo)準(zhǔn)品) (-)-Licarin B 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Humayrosinekinasewithimmunoglobulin-likeandEGF-likedomains1,Tie1ELISAKit人血管**素受體/含球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪氨酸激酶1(Tie1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
利血平(標(biāo)準(zhǔn)品) Reserpine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體β(PPAR-β)ELISA試劑盒 ，英文名： PPAR-β ELISA Kit白頭翁素 HPLC≥98% 20mg 10倍酵母菌SD-HIS培養(yǎng)基100毫升
白頭翁皂苷A HPLC≥98% 20mg 10倍酵母菌SD-LEU/P培養(yǎng)基100毫升
白頭翁皂苷B HPLC≥98% 2mg 10倍酵母菌SD-LEU培養(yǎng)基100毫升
白頭翁皂苷B HPLC-ELSD≥95% 20mg 10倍酵母菌SD-P/URA培養(yǎng)基100毫升
白頭翁皂苷D HPLC≥98% 5mg 10倍酵母菌SD-P培養(yǎng)基100毫升
白鮮堿 HPLC≥98% 20mg 10倍酵母菌SD-URA培養(yǎng)基(半乳糖)100毫
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
B16；小鼠黑色素瘤細(xì)胞通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。