細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號(hào)12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性:
細(xì)胞名稱 雜交瘤細(xì)胞;140-1
形態(tài)特性 母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開(kāi)。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
產(chǎn)品名稱 |
140-1;雜交瘤細(xì)胞 |
生長(zhǎng)特性 |
半貼壁生長(zhǎng) |
貨號(hào) |
BJ-01X85741 |
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程:
CCL1 Protein Mouse 重組小鼠 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)磺胺甲惡唑羥胺 Sulfamethoxazole Hydroxylamine質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
RF/6A(猴視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H10N3 (A/mallard/Minnesota/Sg-00194/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 4-硝基磺胺甲惡唑4-Nitro
Sulfamethoxazole質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
化大家鼠肺成纖維細(xì)胞;NRm2-羥基雌二醇2-hydroxy
Estradiol質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞 (HCMEC)( 5×105 )乙硫異煙胺亞砜amide Sulfoxide質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
CL-0027AsPC-1(胰腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2依曲韋林-d6Etravirine-d6質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口谷氨酸脫氫酶 Glutamate Dehydrogenase 質(zhì)量規(guī)格:>10
U/mg,BC 小鼠p53(p53)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousep53/tumorprotein,p53/TP53ELISAKit
96T/48T
對(duì)羥基苯三唑
HOBT, 1-Hydroxybenzotriazole 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人肥大細(xì)胞類羧肽酶試劑盒 Human Mast Cell Carboxypeptidase ELISA Kit
亞氨基二乙酸(>98%,BR) IDA, Iminodiacetic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
RatL-Phenylalanineammonla-lyase,PALELISAKit大鼠L苯氨酸解氨酶(PAL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
DL-乳酸鋰(>98%,BR)
Lithium lactate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR CYP1A2蛋白共沉淀分析試劑盒5
堿式碳酸鎂五水(>98%,BC) Magnesium carbonate basic pentahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
Mousenicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPHELISA試劑盒小鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
二氧化錳(>97.5%,BC) Manganese dioxide 質(zhì)量規(guī)格:>97.5%,BC 小鼠凝血因子Ⅲ(FⅢ)ELISA試劑盒 ,英文名: FⅢ ELISA Kit
1,3-二苯基脲(>98%,BR)
N,N'-Diphenylurea 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseFactorⅧ-relatedAigen,FⅧAgELISAKit 96T/48T
聚乙二醇600
PEG 600 質(zhì)量規(guī)格:BR 人非小細(xì)胞肺癌相關(guān)抗原211(CA211)試劑盒 Human
cyfra211,CA211 ELISA kit
普魯士蘭(>98%,BS) Prussian blue 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BS RatL-SelectinELISAKit大鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
派洛寧B(Ind) Pyronin B 質(zhì)量規(guī)格:>30%,Ind Grade CYP2B1蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒25人巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 別稱:MIF, GIF, GLIF, Mmacrophage migration inhibitory factor (glycosylation-inhibiting factor), macrophage migration inhibitory factor Human MIF(Macrophage Migration Inhibitory Factor) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測(cè)Human 血清,血漿或其他生物體液中天然
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
140-1;雜交瘤細(xì)胞5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對(duì)象范圍廣,從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物,一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。