細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
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產(chǎn)品名稱 |
生長特性 |
貨號 |
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4D1；小鼠雜交瘤細(xì)胞 |
半貼壁生長 |
BJ-01X85675 |
細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞；4D1
形態(tài)特性 母細(xì)胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞屬保藏，其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
NRG1 Protein
Canine 重組狗 NRG1-alpha 蛋白 (EGF
Domain, Fc 標(biāo)簽)2,9-二氯-1,10-菲羅啉(>97.0%(GC)(T))2,9-Dichloro-1,10-phenanthroline質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)(T)
MDA-MB-435(癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 腦動脈血管平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)3,4,7,8-四甲基-1,10-菲羅啉(>98.0%(HPLC)(T))3,4,7,8-Tetramethyl-1,10-phenanthroline質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)
間充質(zhì)干細(xì)胞生長添加物-無血清MSCGS-25,5'-硫代雙水楊酸(>98.0%(GC)(T))5,5'-Thiodisalicylic Acid質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)
NRXN3 Others
Human NRXN3 / Neurexin-3-beta 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4,4'-二氯二苯砜(>98.0%(GC))4,4'-Dichlorodiphenyl
Sulfone質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)
COS-1 非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞雙[3,5-二溴-4-(2-羥乙氧基)苯基]砜(>96.0%(GC))Bis[3,5-dibromo-4-(2-hydroxyethoxy)phenyl]
Sulfone質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(GC)二苯砜(標(biāo)準(zhǔn)品) Diphenyl
sulfone 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5% 大鼠(T)ELISA檢測試劑盒RatTestoterone,TELISAKit
96T/48T
樂果(標(biāo)準(zhǔn)品) Dimethoate 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品，99.3% 人端粒酶(TE)試劑盒 Human telomerase,TE ELISA Kit
三氯殺螨醇標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=5%) Dicofol standard solution 質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=5% RatMothersagainstdecapeaplegichomolog1,Smad1ELISAKit大鼠Smad1ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
三氯殺螨醇標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=6%) Dicofol standard solution 質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=6% DNA損傷彗星中性檢測完全試劑盒(銀染)20
烯唑醇(標(biāo)準(zhǔn)品) Diniconazole 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%
MousePlatelet-DerivedGrowthFactorAB,PDGF-ABELISA試劑盒小鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
二乙二醇(標(biāo)準(zhǔn)品) Diethylene glycol 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA試劑盒 ，英文名： OVA sIgG ELISA Kit
二乙二醇(Standard for GC,≥99.5%(GC)) Diethylene glycol 質(zhì)量規(guī)格：Standard
for GC,≥99.5%(GC) 大鼠脫氫表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA檢測試劑盒RatDehydroepiandrosteronesulfate,DHEA-SELISAKit
96T/48T
十二醇(標(biāo)準(zhǔn)品) 1-Dodecanol 質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,>99%(GC) 人端粒保護(hù)蛋白1(POT1)試劑盒 Human POT1 ELISA kit
直接藍(lán)6(標(biāo)準(zhǔn)品) DIRECT BLUE 6 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 RatMothersagainstdecapeaplegichomolog7,Smad7ELISAKit大鼠Smad7ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
分散橙37(標(biāo)準(zhǔn)品) Disperse Orange 37 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 DNA損傷彗星中性檢測完全試劑盒(熒光染色)20人可溶性胸苷激酶1(TK1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱:TK1 Human TK1(Thymidine Kinase 1, Soluble) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組TK1濃度
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4D1；小鼠雜交瘤細(xì)胞4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。