細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號(hào)12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
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產(chǎn)品名稱 |
生長特性 |
貨號(hào) |
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L615；小鼠網(wǎng)織細(xì)胞性白血病細(xì)胞 |
懸浮生長 |
BJ-01X85392 |
細(xì)胞名稱 L615；小鼠網(wǎng)織細(xì)胞性白血病細(xì)胞
形態(tài)特性 母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 L6565細(xì)胞源自L6565白血病小鼠的脾細(xì)胞胰懸液。染色體數(shù)從38到144不等。電鏡觀察證明L6565克隆細(xì)胞核邊界清晰，細(xì)胞質(zhì)中oragnalles和A類C類病毒顆粒豐富。 c-myc和c-fos過量表達(dá)。 L6565細(xì)胞克隆是一株含有RNA病毒的細(xì)胞白血病干細(xì)胞。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清，10%
傳代方法 1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
GP1BB Others
Human GP1Bβ / CD42c 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 阿托伐醌,阿托喹酮（標(biāo)準(zhǔn)品）Atovaquone質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-BE1阿昔洛韋鈉鹽Acyclovir 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
CLEC10A Others
Mouse 小鼠 CLEC10A / MGL1 / CD301 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 阿昔洛韋單1酸鹽Acyclovir Monophosphate 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
COLO320/DM 結(jié)腸癌細(xì)胞阿昔洛韋-d4Acyclovir-d4 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
HCT 116結(jié)腸癌細(xì)胞 HCT 116 human colon cancer cells MycCoy's 5A+10%FBSN2-乙?；?span lang="EN-US">-9-
（2-乙酰氧基乙氧基甲基）鳥嘌呤（阿昔洛韋雜質(zhì)）N2-Acetyl-9-(2-acetoxyethoxymethyl)guanine (Acyclovir Impurity)質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口弗羅利辛 HPLC≥98% 20mg 冰凍切片組織BAX蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20
毛冬青皂苷甲 HPLC≥90% 20mg
RatClusterofdiffereiation3,CD3ELISA試劑盒大鼠CD3分子(CD3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
冬青素A, HPLC≥98% 20mg 小鼠血小板/內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(PECAM1)ELISA試劑盒 ，英文名： PECAM1 ELISA Kit
車葉草苷酸 HPLC≥98% 10mg 牛0酸烯醇式酸羧激酶(PCK)ELISA檢測試劑盒Bovinephosphoenolpyruvatecarboxykinase,PCKELISAKit
96T/48T
曲札茋苷 HPLC≥98% 20mg 人8異前列腺素F2α(8-iso-PGF2a)試劑盒 Human 8-iso prostaglandin F2α,8-iso-PGF2a ELISA Kit
去氧土大黃苷；甲基虎杖苷 HPLC≥98% 20mg 英文名稱MouseIerleukin-1α,IL-1αELISAkit小鼠白介素1α(IL-1α)規(guī)格：96T/48T
密力特苷 HPLC≥98% 5mg 冰凍切片組織BCL2蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20
靈芝酸C HPLC≥98% 10mg
RatClusterofdiffereiation30,CD30ELISA試劑盒大鼠CD30分子(CD30)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
苦參酮 HPLC≥98% 2mg 小鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒 ，英文名： FDP ELISA Kit
異苦參酮 HPLC≥98% 2mg 小鼠病毒(MMTV)ELISA檢測試劑盒mousemamaryumorvirus,MMTVELISAKit 96T/48T人β(LTβ)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱:LTB, TNFC, TNFSF3, p33, Lymphotoxin beta, TNLG1C, LT-beta, Tumor necrosis factor C, TNF-C, Tumor necrosis factor ligand superfamily member 3 Human LTβ(Lymphotoxin Beta) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組LTβ濃度
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
L615；小鼠網(wǎng)織細(xì)胞性白血病細(xì)胞4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。