細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
|
產(chǎn)品名稱 |
生長特性 |
貨號 |
|
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]；小鼠成纖維細(xì)胞 |
貼壁生長 |
BJ-01X85367 |
細(xì)胞名稱 NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]；小鼠成纖維細(xì)胞
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 1948年三月建立了NCTC clone 929(小鼠結(jié)締組織)，細(xì)胞系L的克隆。細(xì)胞系L是*早建立的連續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞系之一，而clone 929是*早的克隆株。 從一只100日齡的雄性C3H/An小鼠的正常皮下疏松結(jié)締組織入脂肪組織中建立了親本細(xì)胞系L。 第95代的細(xì)胞系L使用毛細(xì)管法分離單細(xì)胞建立了clone929。 檢測發(fā)現(xiàn)鼠痘病毒陰性。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle＇s Balanced Salts) 馬血清，10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 P(560+5)
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
肝竇內(nèi)皮細(xì)胞HHSEC6-嘌呤-2'-脫氧核苷6-Mercaptopurine-2'-deoxyriboside質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
SERPINA6 Others
Human SerpinA6 / CBG 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 奧美拉唑砜Omeprazole
Sulfone質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
HSF 皮膚成纖維樣細(xì)胞奧美拉唑N-氧化物Omeprazole N-Oxide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
CM-H131角膜成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL4-去甲氧基-4-硝基奧美拉唑硫化物4-Desmethoxy-4-nitro
Omeprazole Sulfide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
QGY-7701, 肝癌細(xì)胞5-羥基奧美拉唑鈉鹽5-Hydroxy Omeprazole Salt質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口鳶尾苷(標(biāo)準(zhǔn)品)
Tectoridin 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA檢測試劑盒Ratglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISAKit
96T/48T
鳶尾黃素（標(biāo)準(zhǔn)品）
Tectorigenin 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 人膀胱腫瘤抗原(BTA)試劑盒 Human Bladder tumor aigen,BTA ELISA Kit
原B2(標(biāo)準(zhǔn)品) Procyanidin B2 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 RatVitaminE,VEELISAKit大鼠維生素E(VE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
原人參二醇（標(biāo)準(zhǔn)品）
Protopanaxdiol 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 P16蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25
原人參三醇(標(biāo)準(zhǔn)品) Protopanaxatriol 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 PorcineIerleukin1,IL-1ELISA試劑盒豬白介素1(IL-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
原薯蕷皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Protodioscin 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠骨鈣素(OC)ELISA試劑盒 ，英文名： OC ELISA Kit
原蘇木素B/原巴西蘇木素（標(biāo)準(zhǔn)品） Protosappanin B 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 人神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA檢測試劑盒HumanneuropeptideY,NP-YELISAKit
96T/48T
遠(yuǎn)志酸（標(biāo)準(zhǔn)品）
Polygalacic acid 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠酸性成纖維細(xì)胞生長因子(aFGF/FGF-1)試劑盒 Rat
acidic fibroblast growth factor,aFGF/FGF-1 ELISA Kit
遠(yuǎn)志皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品) Senegenin 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱RatEpithelialneuophilactivatingpeptide-78ELISAKit大鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽(ENA-78)規(guī)格：96T/48T
月桂烯（香葉烯） Myrcene 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥80%，標(biāo)準(zhǔn)品 環(huán)境無機(jī)0/游離0酸根離子比色法定量檢測試劑盒20人胰島素樣生長因子2(IGF-2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱:IGF2, IGF-II Human IGF-2(Insulin Like Growth Factor 2) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組IGF-2濃度
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]；小鼠成纖維細(xì)胞5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。