細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 |
生長特性 |
貨號 |
C3H/10T1/2, Clone 8;小鼠胚胎成纖維細胞 |
貼壁生長 |
BJ-01X85361 |
細胞名稱 C3H/10T1/2, Clone 8;小鼠胚胎成纖維細胞
形態(tài)特性 成纖維細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系是由C. Reznikoff等(1972)從C3H系小鼠胚胎細胞分離。此細胞對過度長滿的細胞有絲分裂抑制非常敏感,在同源小鼠中不產(chǎn)生腫瘤,無自然轉化的背景,也不含明顯內(nèi)源性轉化鼠類白血病或肉瘤病毒。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 P(10+5)
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
細胞STR鑒定服務流程:
肝內(nèi)膽管上皮細胞總RNAHIBEpiC NA托瑞米芬(標準品)Toremifene 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
PAK3 Others
Human PAK3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 奧昔布寧N氧化物Oxybutynin N-Oxide質量規(guī)格:美國進口
中國倉鼠卵巢細胞;TPO-CHO-I(R)-N-去乙基奧昔布寧鹽酸鹽(R)-N-Desethyl Oxybutynin 質量規(guī)格:美國進口
SMC-1細胞,胸膜細胞瘤 早幼粒急性白血病細胞系,HL-60細胞 小鼠子細胞;U14α-去環(huán)己基-α-苯基奧昔布寧α-Descyclohexyl-α-phenyl Oxybutynin質量規(guī)格:美國進口
小鼠樹突狀細胞肉瘤低轉移細胞(綠色熒光蛋白標記);DG6-GFP(S)-N-去乙基鹽酸奧昔布寧(S)-N-Desethyl Oxybutynin 質量規(guī)格:美國進口柯里拉京(標準品) Corilagin 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 人水通道蛋白2(AQP-2)ELISA檢測試劑盒HumanAquaporin2,AQP-2ELISAKit
96T/48T
人參皂苷F3(標準品) Ginsenoside F3 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 大鼠絲氨酸蛋白酶抑制劑alpha-1 試劑盒 Rat
serine protease inhibitor alpha 1 ELISA kit
槐定堿(標準品)
Sophoridine 質量規(guī)格:HPLC≥96.50%,標準品 英文名稱RatT3ELISAKit大鼠狀腺原氨酸(T3)ELISAKit規(guī)格:96T/48T
去甲澤拉木醛(標準品)
Demethylzeylasteral 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 活化蛋白C(APC)活性比色法定量檢測試劑盒20
鹽酸去氫駱駝蓬堿(標準品)
Harmine 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 ELISAKitTS人胸苷酸合成酶規(guī)格:48T/96T
巖大戟內(nèi)酯B(標準品) Jolkinolide B 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒 ,英文名: BMP-4 ELISA Kit
路路通內(nèi)酯(標準品)
Liquidambaric lactone 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 大鼠血清(NO)ELISA檢測試劑盒Ratniicoxide,NOELISAKit
96T/48T
甘油三油酸酯(標準品)
Glycerine trioleate 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 人瘢痕性天皰瘡抗體(CP)試劑盒 Human cicaicial Pemphigoid,CP ELISA Kit
長春花堿(標準品)
Vinblastine 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 Ratα-Glucosidase,a-GluELISAKit大鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
長春花堿 Vinblastine 質量規(guī)格:HPLC≥98%,BR P1噬菌體培養(yǎng)試劑盒10人肝配蛋白A受體3(EPHA3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱:EPHA3, Epha3, AW492086, Cek4, ETK1, End3, Hek, Hek4, Mek4, Tyro4, EK4, ETK, EPH receptor A3, HEK, HEK4, TYRO4 Human EPHA3(Ephrin Type A Receptor 3) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組EPHA3濃度
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞產(chǎn)品僅用于科研
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
C3H/10T1/2, Clone 8;小鼠胚胎成纖維細胞2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。