細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
細(xì)胞名稱 MFC-B5-GFP；小鼠前胃癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞（綠色熒光蛋白標(biāo)記）
形態(tài)特性 上皮樣；多角
生長特性 貼壁生長
特征特性 GFP穩(wěn)定表達(dá)
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
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產(chǎn)品名稱 |
MFC-B5-GFP；小鼠前胃癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞（綠色熒光蛋白標(biāo)記） |
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生長特性 |
貼壁生長 |
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貨號 |
BJ-01X85270 |
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
AMTN Others
Human AMTN / Amelotin 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 醋酸恩夫韋地 Enfuvirtide Acetate質(zhì)量規(guī)格：BR,>98%
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-Swiss albinoD-海藻糖無水D-(+)-Trehalose Anhydrous質(zhì)量規(guī)格：≥99%,BR
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-1F3 彈性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL二醋酸戈那瑞林(LH-RH)Gonadorelin Acetate質(zhì)量規(guī)格：>98%,二醋酸鹽
A549, 肺癌細(xì)胞系 Human醋酸戈舍瑞林 Goserelin Acetate質(zhì)量規(guī)格：BR,>98%
NETO1 Others
Human NETO1 / BTCL1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 醋酸亮丙瑞林 Leuprolide Acetate質(zhì)量規(guī)格：BR,>98%三(4,7-二苯基-1,10-菲繞啉酯)氯化鈉釕（1mM 溶液）
Tris(bathophenanthrolinedisulfonate)ruthenium(II) salt solution 質(zhì)量規(guī)格：1mM，BC
RatC-typenaiureticpeptide,CNPELISA試劑盒大鼠C型尿肽(CNP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
胰蛋白酶原
Trypsinogen >2500U/mg from bovine pancreas 質(zhì)量規(guī)格：BC 小鼠二氫乳清酸脫氫酶(DHODH)ELISA試劑盒 ，英文名： DHODH ELISA Kit
色胺(>98%,BR) Tryptamine 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人嗜鉻蛋白A(CgA)ELISA檢測試劑盒HumanChromogranin,CgAELISAKit 96T/48T
三氧化鎢(>99%,BC) Tungsten (VI) oxide 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BC 大鼠前列腺素H2(PGH2)試劑盒 Rat
Prostaglandin H2,PGH2 ELISA Kit
碳化鎢200(>99%,BC) Tungsten carbide-200 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BC 英文名稱Ratai-thrombieceptorELISAKit大鼠抗凝血酶受體(A)規(guī)格：96T/48T
鎢粉（200目）(>99.8%,BR) Tungsten powder 質(zhì)量規(guī)格：>99.8%,BR 離子膜通道轉(zhuǎn)運功能檢測試劑盒20
鎢酸(>98%,BC) Tungstic (VI) acid 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC
ELISAKitCpG-ODN人未甲基化寡聚脫氧核苷酸規(guī)格：48T/96T
震顫(>98%,BC) Verruculogen from Penicillium
verruculosum 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC 小鼠二氫嘧啶脫氫酶(DPYD)ELISA試劑盒 ，英文名： DPYD ELISA Kit
羊毛脂
Wool fat 質(zhì)量規(guī)格：BR 人未0酸化類胰島素生長因子結(jié)合蛋白-1ELISA檢測試劑盒HumanNon-PhosphorylatedIGFBP-1ELISAKit
96T/48T
5--4-氯-3-吲哚基-Β-D-葡萄糖醛酸鈉鹽 X-GLUC, salt 質(zhì)量規(guī)格：>98%,分子生物學(xué)級 大鼠前列腺素F合成酶(PGFS)試劑盒 Rat prostaglandin F syhase,PGFS ELISA Kit人內(nèi)皮糖蛋白(ENG)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱:CD105, END, HHT1, ORW, ORW1 Human ENG(Endoglin) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組ENG濃度
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
MFC-B5-GFP；小鼠前胃癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞（綠色熒光蛋白標(biāo)記）4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。