細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
細胞名稱 M5076；小鼠網(wǎng)織細胞肉瘤
形態(tài)特性 梭形
生長特性 半懸浮生長，貼壁細胞呈短梭形。
特征特性 該細胞來源于C57BL/6小鼠卵巢組織自發(fā)的網(wǎng)織細胞肉瘤，經(jīng)細胞形態(tài)和功能鑒定后為巨噬細胞來源：該細胞具有吞噬活性；表達Fc受體，與綿羊紅細胞形成玫瑰花環(huán)；對51Cr標記的紅細胞具有抗體依賴的細胞毒反應；對同源小鼠腫瘤細胞（B16-F1）有巨噬細胞樣的細胞毒作用，且不需要LPS的激活；沒有NK細胞的活性；具有同小鼠腹腔巨噬細胞相當?shù)娜芫?、非特異性酯酶和磷酸酶的活性；超微結構顯示該細胞內(nèi)有吞噬小泡，缺乏緊密連接，這些特點都符合巨噬細胞的形態(tài)特征。核型分析顯示該細胞為亞二倍體，因羅伯遜易位，>80%的染色體
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15% HS
傳代方法 1:2~1:3傳代，3~4天1次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
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產(chǎn)品名稱 |
M5076；小鼠網(wǎng)織細胞肉瘤 |
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生長特性 |
半懸浮生長，貼壁細胞呈短梭形。 |
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貨號 |
BJ-01X85243 |
細胞STR鑒定服務流程：
Hs 746T(胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2單1酸阿糖腺苷;阿糖腺苷單1酸ARA-AMP;Vidarabine monophosphate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
Gibco 17100017 Collagenase
Type I 1gα-萘黃酮α-Naphthoflavone質(zhì)量規(guī)格：>98%, 進口
晶狀體上皮細胞裂解物HLEpiCL紫脲酸銨Murexide質(zhì)量規(guī)格：ACS
ALDH3A1 Others
Human ALDH3A1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸羥胺Hydroxylammonium chloride質(zhì)量規(guī)格：AR
小鼠色素瘤細胞;B163,3'-二甲基聯(lián)萘胺3,3'-Dimethylnaphthidine質(zhì)量規(guī)格：>97%,進分膽戊基碳酸酯
Cholesterol Amyl Carbonate 質(zhì)量規(guī)格： Humahymusactivatioegulatedchemokine,TARCELISAKit人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
膽正辛基碳酸酯
Cholesterol n-Octyl Carbonate 質(zhì)量規(guī)格：
小鼠凋亡相關因子(Fas/Apo-1/CD95)ELISA試劑盒 ，英文名： Fas/Apo-1/CD95 ELISA Kit
膽己基碳酸酯
Cholesterol Hexyl Carbonate 質(zhì)量規(guī)格：
雞γ干擾素(IFN-γ)ELISA檢測試劑盒ChickenIerferonγ,IFN-γELISAKit 96T/48T
4-(4-乙氧苯氧羰基)苯基碳酸戊酯(>95.0%(HPLC)) Amyl 4-(4-Ethoxyphenoxycarbonyl)phenyl
Carbonate 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC) 人Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)試劑盒 Human type Ⅱ collagen
helical peptide,HELIX-ⅡELISA Kit
碳酸丁基4-羧苯酯(>98.0%(T)) Butyl 4-Carboxyphenyl Carbonate 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) 英文名稱Mouselymphocytefunctionassociatedaigen-3ELISAKit小鼠LFA-3(CD58)規(guī)格：96T/48T
水楊酸-4-辛基苯酯(>95.0%(GC)) 4-Octylphenyl Salicylate 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC) 冰凍切片組織MAPK蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20
氧化偶氮苯-4,4'-二羧酸二乙酯(>97.0%(GC)) Diethyl Azoxybenzene-4,4'-dicarboxylate 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)
Ratcyclicadenosinemonophosphate,cAMPELISA試劑盒大鼠環(huán)0酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
4,4'-雙(己氧基)氧化偶氮苯(>96.0%(N)) 4,4'-Bis(hexyloxy)azoxybenzene 質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(N) 小鼠凋亡相關因子(FAS)ELISA試劑盒 ，英文名： FAS ELISA Kit
4,4'-二戊氧基氧化偶氮苯(>95.0%(N))
4,4'-Diamyloxyazoxybenzene 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(N) 雞促黃體(LH)ELISA檢測試劑盒ChickenLeinizingHormone,LHELISAKit 96T/48T
4,4'-二丁氧基氧化偶氮苯 4,4'-Dibutoxyazoxybenzene 質(zhì)量規(guī)格： 人Ⅱ型膠原交聯(lián)C端肽(CTX-Ⅱ)試劑盒 Human Cross Linked C-Telopeptide Of Type II Collagen,CTX-Ⅱ ELISA Kit人促腎上腺皮質(zhì)釋放(CRH)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱:CRF, Corticoliberin Human CRH(Corticotropin Releasing Hormone) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測人血清、血漿或其他相關生物液體中天然及部分重組CRH濃度。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞產(chǎn)品僅用于科研
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
M5076；小鼠網(wǎng)織細胞肉瘤2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。