細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
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產(chǎn)品名稱 |
生長特性 |
貨號 |
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Mouse podocyte；小鼠腎足細(xì)胞 |
貼壁生長 |
BJ-01X85237 |
細(xì)胞名稱 Mouse podocyte；小鼠腎足細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
形態(tài)特性 多邊
生長特性 貼壁生長
特征特性 利用穩(wěn)定敏感的SV40T轉(zhuǎn)染建立的條件性永生化的腎足細(xì)胞；33℃/干擾素存在條件下，細(xì)胞增殖；37℃培養(yǎng)6天以上，細(xì)胞分化；表達(dá)WT-1，對緩激肽有反應(yīng)。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS；r-IFN(r-干擾素)
傳代方法 1:3傳代；2~3天換液1次。
傳代情況 P24
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
HIC(小腸癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2膽酸Cholic acid質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BR，無水
ACE2 Others
Human ACE2 / ACEH 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 膽酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Cholic acid質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
口腔角質(zhì)細(xì)胞HOK黨參炔苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Lobetyolin質(zhì)量規(guī)格：僅供鑒別用
HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/England/195/2009) HA 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) α-倒捻子素(標(biāo)準(zhǔn)品)α-mangostin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
KMB17 胚肺成纖維細(xì)胞地奧司明(標(biāo)準(zhǔn)品)Diosimin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品5-硝基吲哚(>98.0%(GC)) 5-Nitroindole 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) Rabbitacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISA試劑盒兔乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
鋁酞菁(>98.0%(T)) Phthalocyanine Chloroaluminum 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) 小鼠抵抗素(Resistin)ELISA 試劑盒
酞菁鐵(II)(升華提)(>98.0%(T)) Iron(II) Phthalocyanine (purified by
sublimation) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) Rat Neuroglobin (NGB) ELISA Kit 大鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒
酞菁(>93.0%(N)) Phthalocyanine 質(zhì)量規(guī)格：>93.0%(N)
humanpapillomavirusIgG,HPV-IgGELISAKit 人狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
顏料藍(lán)15,酞菁藍(lán)B Pigment Blue 15 質(zhì)量規(guī)格： HumanarylsulfataseA,ASAELISA試劑盒人芳基酯酶A(ASA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
顏料綠 7
Pigment Green 7 質(zhì)量規(guī)格：
植物源性食品開心果(Pistachio)試劑盒20
酞菁鉛(II)(>95.0%(T)) Lead(II) Phthalocyanine 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(T)
HumahymosinELISAKit人胸腺肽(Thymosin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
酞菁鋅(>95.0%(T)) Zinc Phthalocyanine 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(T) 小鼠低氧誘導(dǎo)因子2α(HIF2α)ELISA試劑盒 ，英文名： HIF2α ELISA Kit
酞菁鐵(II)(>95.0%(T)) Iron(II) Phthalocyanine 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(T) 人平滑肌肌球蛋白(SMM)ELISA檢測試劑盒HumansmoothmuscleMyosin,SMMELISAKit
96T/48T
酞菁二鈉 Di Phthalocyanine 質(zhì)量規(guī)格： 大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)試劑盒 Rat Gelsolin ELISA Kit人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱:CCL20, CKb4, LARC, MIP3A, SCYA20, ST38 Human MIP-3α(Macrophage Inflammatory Protein 3 Alpha) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組MIP-3α濃度
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
Mouse podocyte；小鼠腎足細(xì)胞1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。