細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
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產(chǎn)品名稱 |
生長特性 |
貨號 |
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BALB/C 3T3；小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 |
貼壁生長 |
BJ-01X85228 |
細(xì)胞名稱 BALB/C 3T3；小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代；2~3天1次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
CD79B Others Rat 大鼠 CD79B / B29 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 稻瘟靈（標(biāo)準(zhǔn)品） Isoprothiolane質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,97.5%
椎間盤髓核細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL咪唑乙煙酸（標(biāo)準(zhǔn)品）Imazethapyr質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%
VERO C1008 (E6)細(xì)胞，非洲綠猴腎細(xì)胞 CHO/dhFr-(中國倉鼠二氫葉酸還原酶缺陷細(xì)胞) 小鼠T瘤細(xì)胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA異丙?。?biāo)準(zhǔn)品） Isoproturon solution質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%
EFNB2 Protein
Canine 重組狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標(biāo)簽)甲咪唑煙酸（標(biāo)準(zhǔn)品） Imazapic質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品
V79(倉鼠肺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠前胃癌細(xì)胞;MFC異標(biāo)準(zhǔn)溶液（10μg/ml,u=6%）Iprobenfos standard solution質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=6%三乙酰基-β-環(huán)糊精(>97.0%(HPLC)) Triacetyl-β-cyclodextrin 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(HPLC)
ELISAKitiNV人套膜蛋白規(guī)格：48T/96T
10,12-二十七二炔酸(>98.0%(GC))
10,12-Heptacosadiynoic Acid 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 小鼠蛋酸酯酶2B(PP-2B)ELISA試劑盒
2,4-十七二炔酸(>95.0%(T))
2,4-Heptadecadiynoic Acid 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(T) Rat gelsolin (Gelsolin) ELISA Kit 大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒
2,4-二十一二炔酸(>95.0%(T))
2,4-Heneicosadiynoic Acid 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(T) HumancardiacoponinⅠ,cTn-ⅠELISAKit 人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
10,12-十七二炔酸(>97.0%(T))
10,12-Heptadecadiynoic Acid 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T) HumanAtaxiatelangiectasiamated,ATMELISA試劑盒人擴張性共濟失調(diào)突變基因(ATM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
10,12-二十九二炔酸(>97.0%(T))
10,12-Nonacosadiynoic Acid 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T) 植物源性食品小麥(wheat)試劑盒20
2,4-十九二炔酸(>97.0%(T))
2,4-Nonadecadiynoic Acid 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T) Humahrombusprecursorprotein,TpPELISAKit人血栓前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
10,12-二十五二炔酸(>97.0%(GC)(T))
10,12-Pentacosadiynoic Acid 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)(T) 小鼠蛋酸酶3調(diào)節(jié)因子亞基1(PPP3R1)ELISA試劑盒 ，英文名： PPP3R1 ELISA Kit
2,4-十五二炔酸(>97.0%(T))
2,4-Pentadecadiynoic Acid 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T) 人類白細(xì)胞抗原G(HLA-G)ELISA檢測試劑盒HumanleukocyteaigenG,HLA-GELISAKit 96T/48T
10,12-二十三聯(lián)炔酸(>98.0%(GC)(T)) 10,12-Tricosadiynoic Acid 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T) 大鼠尿激酶(UK)試劑盒 Rat urokinase,UK ELISA Kit人Smad同源物3(Smad3/MADH3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱:SMAD3, HSPC193, HsT17436, JV15-2, LDS1C, LDS3, MADH3 Human Smad3/MADH3(Mothers Against Decapentaplegic Homolog 3) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組Smad3/MADH3濃度
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際進行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
BALB/C 3T3；小鼠胚胎成纖維細(xì)胞4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。