細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號(hào)12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 |
生長(zhǎng)特性 |
貨號(hào) |
FDC-P1;小鼠骨髓細(xì)胞 |
懸浮生長(zhǎng) |
BJ-01X85214 |
細(xì)胞名稱 FDC-P1;小鼠骨髓細(xì)胞
形態(tài)特性 母細(xì)胞樣;單個(gè)或成簇生長(zhǎng)
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞是從在WEHI-3細(xì)胞條件化培養(yǎng)基中長(zhǎng)期培養(yǎng)的DBA/2小鼠正常骨髓細(xì)胞建立的;細(xì)胞的持續(xù)生長(zhǎng)依賴于WEHI-3細(xì)胞的條件化培養(yǎng)基。該細(xì)胞表達(dá)Thy-1.2 (24%)。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;IL-3
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程:
3T6-Swiss albino細(xì)胞,胚胎成纖維細(xì)胞 胰腺癌細(xì)胞,CaPan-Ⅱ/Capan-2細(xì)胞 CM-M040小鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL丁胺卡那霉素?zé)o水Amikacin質(zhì)量規(guī)格:效價(jià):>900 u/mg
正常大鼠腎細(xì)胞;NRK氨茶堿(>98%,BR)Aminophyllin
hydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
CDH6 Others
Human CDH6 / KCAD 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 檸檬酸鉍銨Ammonium
bismuth , hydrate質(zhì)量規(guī)格:BR
脈絡(luò)叢成纖維細(xì)胞cDNAHCPF cDNA溴化銨(>99%,BR)Ammonium
bromide質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
KLK7 Others Mouse 小鼠 KLK7 / Kallikrein 7 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 化銨(>99%,BR)Ammonium iodide質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR己二酸二乙酯(>99.0%(GC)) Diethyl Adipate 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) 小鼠血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouse50%complemehemolysis,CH50ELISAKit
96T/48T
己二酸二異癸酯
Diisodecyl Adipate 質(zhì)量規(guī)格:
人抗BP180抗體(ai-BP180-Ab)試劑盒 Human ai-BP180-Ab ELISA Kit
壬二酸雙(2-乙基己基)酯(>75.0%(GC)) Bis(2-ethylhexyl)
Azelate 質(zhì)量規(guī)格:>75.0%(GC)
RatAcetylcholinesterase,AChEELISAKit大鼠乙酰膽堿酯酶(AChE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
己二酸二異丙酯(>99.0%(GC)) Diisopropyl Adipate 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) 載玻片細(xì)胞PI-3KINASEP110BETA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
己二酸雙(2-丁氧乙基)酯(>97.0%(GC)) Bis(2-butoxyethyl) Adipate 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 英文名稱MouseIGFBP4ELISAkit小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白4(IGFBP4)規(guī)格:96T/48T
油酸乙酯(>70.0%(GC)) Ethyl Oleate 質(zhì)量規(guī)格:>70.0%(GC) PROTEINASEK酶解法石蠟切片抗原修復(fù)處理試劑盒50人胱天蛋白酶1(CASP1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 別稱:ICE, IL1BC, P45, Interleukin 1 Beta Converting Enzyme, Apoptosis-Related Cysteine Peptidase Human CASP1(Caspase 1) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測(cè)Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組CASP1濃度
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
FDC-P1;小鼠骨髓細(xì)胞1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對(duì)象范圍廣,從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物,一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。