注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱	馬梨形蟲(chóng)病(Piroplasmosis)雙重核酸試劑盒說(shuō)明書(shū)
英文名稱	詳見(jiàn)說(shuō)明
貨號(hào)	BJ-R015074

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

◇高特異性：與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng)，無(wú)非特異性擴(kuò)增；

◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；

◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；

◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

實(shí)驗(yàn)過(guò)程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書(shū)；陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取，可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）

取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。

馬梨形蟲(chóng)病(Piroplasmosis)雙重核酸試劑盒說(shuō)明書(shū)組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。

兔抗酸性0酸酶5b(rabbit ACP-5b)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  4-Difluoromethoxy-3-hydroxybenzaldehyde  151103-08-1  中文名：  分子式：C8H6F2O3 

兔抗平滑肌抗體elisa試劑盒   兔抗平滑肌抗體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔抗平滑肌抗體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔抗平滑肌抗體試劑盒、兔抗平滑肌抗體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  5,6,7,7a-Tetrahydrothieno[3,2-c]pyridine-2(4H)-one   115473-15-9  中文名：  分子式：C7H10ClNOS 

兔抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒              5,6,7,7a-Tetrahydrothieno[3,2-c]pyridine-2(4H)-one   中文名：  分子式：C7H10ClNOS 

兔抗凝血酶elisa試劑盒   兔抗凝血酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔抗凝血酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔抗凝血酶試劑盒、兔抗凝血酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  5-(4-(2-(5-Ethylpyridin-2-yl)ethoxy)benzylidene)thiazolidine-2,4-dione  中文名：  分子式：C19H18N2O3S  度：98.0%

兔抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA試劑盒     5-(4-(2-(5-Ethylpyridin-2-yl)ethoxy)benzylidene)thiazolidine-2,4-dione  144809-28-9  中文名：  分子式：C19H18N2O3S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：

四甲基錫(>96.0%(GC))  Tetramethyltin  質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(GC) ELISAKitiNOS人誘導(dǎo)型合成酶規(guī)格：48T/96T

二氯二茂鋯(>97.0%(T))  Zirconocene Dichloride  質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T) 小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(sCD40L)ELISA 試劑盒

Chirabite-AR[用于核磁共振]  Chirabite-AR  質(zhì)量規(guī)格：用于核磁共振 Rat macrophage inflammatory protein 1 alpha (MIP-1 alpha /CCL3) ELISA Kit 大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒

三(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮酸)鐠(III)(＞98%(T))  Tris(2,2,6,6-tetramethyl-3,5-heptanedionato)praseodymium(III)   質(zhì)量規(guī)格：＞98%(T) Humanheparinsulphateprotoglycans,HSPGELISAKit 人硫酸肝素糖蛋白(HSPG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

三(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮酸)銪(III)(＞95%(T))  Tris(2,2,6,6-tetramethyl-3,5-heptanedionato)europium(III)  質(zhì)量規(guī)格：＞95%(T) Humanalkalinephosphatase,ALPELISA試劑盒人堿性0酸酶(ALP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

三(6,6,7,7,8,8,8-七氟-2,2-二甲基-3,5-辛二酮基)鐠(Ⅲ)(>97.0%(T))  Tris(6,6,7,7,8,8,8-heptafluoro-2,2-dimethyl-3,5-octanedionato)praseodymium(III)  質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T) 植物V型氫ATP酶(H+-ATPase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20

(S)-(+)-1,1'-聯(lián)萘基-2,2'-雙氫酯(>97.0%(T))  (S)-(+)-1,1'-Binaphthyl-2,2'-diyl Hydrogen Phosphate  質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T) Mouse5-Hydroxyyptamine,5HTELISAKit小鼠5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(R,R)-(-)-2,3-丁二醇(>96.0%(GC))  (R,R)-(-)-2,3-Butanediol  質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(GC) 小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原30配體(sCD30L)ELISA 試劑盒

(S,S)-(+)-2,3-丁二醇(>97.0%(GC))  (S,S)-(+)-2,3-Butanediol  質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC) Rat macrophage inflammatory protein 1 beta (MIP-1 beta /CCL4) ELISA Kit 大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒

(-)-樟腦烷酸(>98.0%(T))  (-)-Camphanic Acid  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) Humanprealbumin,PAELISAKit 人前白蛋白(PA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-Monocyteaibody,AMAELISAKit 人抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  15,16-Dihydroxyoctadeca-9Z,12Z-dienoic acid  140129-22-2  中文名：  分子式：C18H32O4  度：%  關(guān)鍵詞：  植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

HumanAi-mitochondriaaoaibodies,AMAELISAKit 人抗線粒體抗體(AMA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  1-Methyl-5-nitro-1H-benzimidazole-2-butanoic acid ethyl ester  中文名：  分子式：C14H17N3O4  度：98.0%

Humanai-Mi2-aibodyELISAKit 人抗Mi2抗體(ai-Mi2-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  1-(2-Chloroacetyl)pyrrolidine-2-carbonitrile  中文名：  分子式：C7H9ClN2O  度：98.0%

Humanai-Ku-aibodyELISAKit 人抗Ku抗體(ai-Ku-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  1-(4-Fluorobenzyl)-2-chlorobenzimidazole  84946-20-3  中文名：  分子式：C14H10ClFN2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

HumanAi-keratinaibody,AKAELISAKit 人抗角蛋白抗體(AKA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  2-(Chloromethyl)-4-methylquinazoline  中文名：  分子式：C10H9ClN2  度：98.0%