注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱 |
植物內(nèi)源基因tRNA-Leu核酸試劑盒說明書 |
英文名稱 |
詳見說明 |
貨號 |
BJ-R015066 |
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
植物內(nèi)源基因tRNA-Leu核酸試劑盒說明書組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
兔熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒
5-Aminoindole 5192-03-0 中文名:5-氨基吲哚 分子式:C8H8N2
兔熱休克蛋白20(HSP-20)ELISAKit 5-Aminoindole 中文名:5-氨基吲哚 分子式:C8H8N2 度:98.0%
兔去甲上腺素elisa試劑盒 兔去甲上腺素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔去甲上腺素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔去甲上腺素試劑盒、兔去甲上腺素elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
5-Aminoindazole 1
兔去甲上腺素(NA)ELISA試劑盒 5-Aminoindazole 中文名:5-氨基吲唑 分子式:C7H7N3
兔去甲上腺素(NA)ELISAKit 4-Benzoyl-3-methyl-1-phenyl-5-pyrazolone 中文名:4-苯甲?;?span lang="EN-US">-3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮 分子式:C17H14N2O2 度:98.0%
甲霜靈標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=5%) Metalaxyl solution 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=5% RatOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISAKit大鼠骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
殺螟硫磷(標(biāo)準(zhǔn)品) Fenitrothion 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 FRUORESCAMINE蛋白質(zhì)濃度熒光定量試劑盒100
矮壯素(標(biāo)準(zhǔn)品) (2-Chloroethyl)trimethylammonium
chloride 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 MouseSlit2ELISA試劑盒小鼠Slit2ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
蕓苔素內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Brassinolide 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA 試劑盒
啶蟲脒(標(biāo)準(zhǔn)品) Acetamiprid 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 Rat macrophage derived chemokine
(MDC/CCL22) ELISA Kit 大鼠巨噬細(xì)胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒
多菌靈(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%) Carbendazim 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99% Humanai-IgAaibodyELISAKit 人抗IgA抗體(ai-IgA-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%)
Carbaryl 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98% HumanAgoiRelatedProtein,AGRPELISA試劑盒人Agoi相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鹽酸水蘇堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Stachydrine 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 植物N-糖基糖蛋白樹脂法化試劑盒5
異水飛薊賓(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%) Isosilybin 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98% MouseADisiegrinAndMetalloprotease9,ADAM9ELISAKit小鼠解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
3,3’-二沒食子酸酯茶黃素(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.0%(HPLC)) Theaflavin 3,3′-digallate 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.0%(HPLC) 小鼠可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體1(sVEGF R1/sFlt1)ELISA試劑盒 ,英文名: sVEGF R1/sFlt1 ELISA Kit
Humancytokeratin19,CK-19ELISA試劑盒人細(xì)胞角蛋白19(CK-19)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T (-)-Phaselic acid 423170-79-0 中文名: 分子式:C13H12O8
Humancytokeratin18,CK-18ELISA試劑盒人細(xì)胞角蛋白18(CK-18)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T (+)-Noe's reagent 中文名:(+)-核歐沃豪斯效應(yīng)試劑 分子式:C24H38O3
Humancytokeratin17,CK-17ELISA試劑盒人細(xì)胞角蛋白17(CK17)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 2-(7-Methoxy-1-naphthyl)ethylamine 139525-77-2 中文名: 分子式:C13H16ClNO
Humancytokeratin13,CK-13ELISA試劑盒人細(xì)胞角蛋白13(CK-13)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 2-(Chloromethyl)-4-methylquinazoline 中文名: 分子式:C10H9ClN2
HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21BELISA試劑盒人細(xì)胞色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 2,2'-Anhydro-5-methyluridine 中文名:2,2'-O-脫水-5-甲基尿嘧啶核苷 分子式:C10H12N2O5