注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱(chēng)： 轉(zhuǎn)基因水稻LLRICE核酸試劑盒原理

英文名稱(chēng):  詳見(jiàn)說(shuō)明
產(chǎn)品貨號(hào)： BJ-R015060

產(chǎn)品規(guī)格： 50T

產(chǎn)品分類(lèi)： 熒光-PCR法

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

◇高特異性：與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng)，無(wú)非特異性擴(kuò)增；

◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；

◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；

◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

實(shí)驗(yàn)過(guò)程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書(shū)；陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取，可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）

取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。

轉(zhuǎn)基因水稻LLRICE核酸試劑盒原理組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。

兔透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒     5-Benzyl L-glutamate  中文名：L-谷氨酸5-芐酯  分子式：C12H15NO4  度：98.0%

兔銅藍(lán)蛋白(CP)ELISA試劑盒              5-Benzyl L-glutamate  中文名：L-谷氨酸5-芐酯  分子式：C12H15NO4 

兔糖化血紅蛋白A1celisa試劑盒   兔糖化血紅蛋白A1c試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔糖化血紅蛋白A1c試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔糖化血紅蛋白A1c試劑盒、兔糖化血紅蛋白A1c elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  5-Benzyl N-(tert-butoxycarbonyl)-L-glutamate  中文名：N-(叔丁氧羰基)-L-谷氨酸-5-芐酯  分子式：C17H23NO6  度：98.0%

兔糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISAKit                 4-Bromomethyl-2-cyanobiphenyl  中文名：  分子式：C14H10BrN 

兔胎盤(pán)生長(zhǎng)因子elisa試劑盒   兔胎盤(pán)生長(zhǎng)因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔胎盤(pán)生長(zhǎng)因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔胎盤(pán)生長(zhǎng)因子試劑盒、兔胎盤(pán)生長(zhǎng)因子elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     5-Benzyl N-(tert-butoxycarbonyl)-L-glutamate  中文名：N-(叔丁氧羰基)-L-谷氨酸-5-芐酯  分子式：C17H23NO6

毒莠定(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%)   Picloram  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5% 英文名稱(chēng)RatTumornecrosisfactorβELISAKIT大鼠腫瘤壞死因子β(TNFβ)規(guī)格：96T/48T

嘧霉胺(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%)  Pyrimethanil  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5% 肝素(heperin)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20

甜菜寧(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%)  Phenmedipham  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99% ELISAKitPROG人孕/孕同規(guī)格：48T/96T

甲霜靈標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=6%)  Metalaxyl solution  質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=6% 小鼠跨膜蛋白97(TMEM97/MAC30)ELISA試劑盒 ，英文名： TMEM97/MAC30 ELISA Kit

氯草定(標(biāo)準(zhǔn)品)  Nitrapyrin  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血管**素2(ANG-2)ELISA檢測(cè)試劑盒RatAngiopoietin2,ANG-2ELISAKit 96T/48T

丙磷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Profenofos  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1(LRP-1)試劑盒 Human LRP-1 ELISA Kit

吡丙醚(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%)  Pyriproxifen  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5% RatNuclearfactor-kappaB,NF-κBELISAKit大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

稻豐散(0.105mg/ml)  Phenthoate solution  質(zhì)量規(guī)格：0.105mg/ml FITC標(biāo)記二抗(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升

敵稗標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.100mg/ml)  Propanil solution  質(zhì)量規(guī)格：0.100mg/ml Mouseserine/threonineproteinkinase,STKELISA試劑盒小鼠絲氨酸/蘇氨酸蛋酸酶(STK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

伏殺硫磷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Phosalone  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠跨膜蛋白27(TMEM27)ELISA試劑盒 ，英文名： TMEM27 ELISA Kit

Humandiamineoxidase,DAOELISA試劑盒人氧化酶(DAO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  17-Ethylendioxyandrosta-1,4-dien-3-one  2398-63-2  中文名：17-亞乙二氧基-雄-1,4-二烯-3-酮  分子式：C21H28O3 

Humandeubiquitinatingenzyme,DUBELISA試劑盒人泛素分解酶(DUB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  17-Hydroxy-1a,2a-methylenepregna-4,6-diene-3,20-dione acetate  中文名：  分子式：C24H30O4 

HumanDesmopressin/1-desamino-8-D-argininevasopressin,dDAVPELISA試劑盒人去氨加壓素/1-去氨基-8-右旋-精氨酸加壓素(dDAVP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  17α-Neriifolin  7044-31-7  中文名：  分子式：C30H46O8 

Humandesmogleins1,DGS-E1ELISA試劑盒人橋粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  17α-Thevebioside  中文名：  分子式：C36H56O13 

Humandesmin,DesELISA試劑盒人結(jié)蛋白(Des)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  17β-Hydroxy-17-methylandrosta-4,9(11)-dien-3-one  1039-17-4  中文名：17β-羥基-17-甲基雄甾-4,9(11)-二烯-3-酮  分子式：C20H28O2