注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱 |
魚源性成分(Fish)核酸試劑盒原理 |
英文名稱 |
詳見(jiàn)說(shuō)明 |
貨號(hào) |
BJ-R015052 |
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書;陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
魚源性成分(Fish)核酸試劑盒原理組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
兔**素2elisa試劑盒 兔**素2試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔**素2試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔**素2試劑盒、兔**素2 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
5-Chloro-2-nitrobenzoic acid
2516-95-2 中文名: 分子式:C7H4ClNO4 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
兔**素2(ANG-2)ELISA試劑盒 5-Benzyloxyindole 1215-59-4 中文名:5-芐氧基吲哚 分子式:C15H13NO 度:98.0%
兔**素2(ANG-2)ELISAKit 5α-Androstane-3β,17β-diol
571-20-0 中文名:5α-雄烷二醇 分子式:C19H32O2
兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1elisa試劑盒 兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1試劑盒、兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
5-Chloro-2-nitrobenzoic acid
2516-95-2 中文名: 分子式:C7H4ClNO4
兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒 5-Benzyloxyindole 1215-59-4 中文名:5-芐氧基吲哚 分子式:C15H13NO
吲哚(standard for GC,>99.5%(GC)) Indole 質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,>99.5%(GC)
Humanadrenalcoexaibody,ACAELISA試劑盒人腎上腺皮質(zhì)抗體(ACA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
辛酸乙酯(Standard for GC,>99%(GC)) Ethyl octanoate 質(zhì)量規(guī)格:Standard
for GC,>99%(GC) 植物DNA甲基轉(zhuǎn)移酶(MET)總活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒20
異辛醇(standard for GC, ≥99.5% (GC)) 2-Ethyl-1-hexanol 質(zhì)量規(guī)格:standard
for GC, ≥99.5% (GC)
mouseadrencocoicoopichormone,ACTHELISAKit小鼠促腎上腺皮質(zhì)(ACTH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
棕櫚酸乙酯(standard for GC,≥99%(GC)) Ethyl palmitate 質(zhì)量規(guī)格:standard
for GC,≥99%(GC) 小鼠類胰蛋白酶(TPS)ELISA試劑盒 ,英文名: TPS ELISA Kit
異辛酸(Standard for GC,≥99.5%(GC)) 2-Ethylhexanoic
acid 質(zhì)量規(guī)格:Standard
for GC,≥99.5%(GC) 人補(bǔ)體片斷3b(C3b)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanComplemefragme3b,C3bELISAKit 96T/48T
茴香醛(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(GC)) p-Anisaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(GC) 大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子A(PDGF-A)試劑盒 Rat
Platelet-Derived Growth Factor A,PDGF-A ELISA kit
己二酸二異辛酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Bis(2-ethylhexyl)adipate 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱RattotalhemolyticcomplemeELISAKit大鼠總?cè)苎a(bǔ)體(CH50)規(guī)格:96T/48T
分散藍(lán) 35(標(biāo)準(zhǔn)品) Disperse Blue 35 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 鈣鎂0酸平衡鹽(PBS)緩沖溶液500毫升
9-甲基蒽(標(biāo)準(zhǔn)品)
9-Methylanthracene 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitMUC5B人粘蛋白/粘液素5B規(guī)格:48T/96T
二甲四氯(標(biāo)準(zhǔn)品) MCPA 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠類5α還原酶1(SRD5α1)ELISA試劑盒 ,英文名: SRD5α1 ELISA Kit
HumanEndocrineglandvascularendothelialgrowthfactor,EG-VEGFELISA試劑盒人腺來(lái)源的內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T (tert-Butoxycarbonyl)oxycefcapene
pivoxil 105889-80-3 中文名: 分子式:C28H37N5O10S2
HumanelonginA,EloAELISA試劑盒人延伸蛋白A(EloA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T (Z)-Butylidenephthalide 中文名: 分子式:C12H12O2
Humanelecon-ansfer-flavoproteinbetapolypeptide,ETFBELISA試劑盒人電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽(ETFB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
1-(2-Amino-5-chlorophenyl)-1-(trifluoromethyl)-3-cyclopropyl-2-propyn-1-ol 209414-27-7 中文名: 分子式:C13H11ClF3NO
HumanElastin,ELNELISA試劑盒人彈性蛋白(ELN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 1-(2-Chloroacetyl)pyrrolidine-2-carbonitrile 中文名: 分子式:C7H9ClN2O
HumanElastaseELISA試劑盒人彈性蛋白酶(Elastase)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 1,18-Octadecanediol 中文名: 分子式:C18H38O2