注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱 |
貂源性成分(Martes)核酸試劑盒說明書 |
英文名稱 |
詳見說明 |
貨號(hào) |
BJ-R015046 |
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
貂源性成分(Martes)核酸試劑盒說明書1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
兔乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISAKit Adipic dihydrazide 中文名:己二酸二 分子式:C6H14N4O2 度:99.0%
兔乙酰膽堿(ACh)ELISA試劑盒 5-O-Ethylcleroindicin D 488138-32-5 中文名: 分子式:C10H16O4 度:% 關(guān)鍵詞: 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
兔乙酰膽堿(ACh)ELISAKit 4-Benzoyloxy-2-azetidinone 28562-58-5 中文名:4-苯甲酰氧基-2-氮雜環(huán)丁酮 分子式:C10H9NO3
兔胰淀素(Amylin)ELISAKit
4-Hydroxy-4-(methoxycarbonylmethyl)cyclohexanone 中文名: 分子式:C9H14O4 度:%
兔胰島素樣生長因子1(rabbit IGF-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine 67219-55-0 中文名:5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-N(4)-苯甲?;?span lang="EN-US">-2'-脫氧胞苷 分子式:C37H35N3O7 度:98.0%
磺胺喹噁啉(標(biāo)準(zhǔn)品) Sulfaquinoxaline 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱RatTissuePolypeptideAigenELISAKit大鼠組織多肽抗原(TPA)ELISAKit規(guī)格:96T/48T
磺胺氯吡嗪(標(biāo)準(zhǔn)品) Sulfalozine 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 鈣離子膜通道鈣泵SERCA(P型ATP酶/內(nèi)質(zhì)網(wǎng))功能熒光檢測試劑盒20
泰妙菌素(標(biāo)準(zhǔn)品) Tiamulin 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKiAES人正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子規(guī)格:48T/96T
化銫(用于高通量質(zhì)譜,99.9995%) Cesium iodide 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于高通量質(zhì)譜,99.9995% 小鼠β(LTβ)ELISA試劑盒 ,英文名: LTβ ELISA Kit
1,3-二甲基-2-咪唑啉酮(用于GC-HS,≥99.8%(GC)) 1,3-Dimethyl-2-imidazolidinone 質(zhì)量規(guī)格:用于GC-HS,≥99.8%(GC) 人組織多肽特異性抗原(TPS)ELISA檢測試劑盒Humaissuepolypeptidespecificaigen,TPSELISAKit
96T/48T
二甲基亞砜(農(nóng)殘級(jí)) Dimethyl sulfoxide 質(zhì)量規(guī)格:農(nóng)殘級(jí) 大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)試劑盒 Rat
Platelet-Derived Growth Factor Soluble Receptor α,PDGFsR-α ELISA kit
十二烷基基氯化銨(DTAC)(99%,離子對色譜級(jí))
Dodecyltrimethylammonium chloride 質(zhì)量規(guī)格:99%,離子對色譜級(jí) 英文名稱RatTissuePolypeptideAigenELISAKit大鼠組織多肽抗原(TPA)ELISAKit規(guī)格:96T/48T
二十酸甲酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0% (GC)) Methyl Arachidate 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0% (GC) 鈣離子膜通道內(nèi)質(zhì)網(wǎng)肌醇1,4,5-三0酸受體(IP3R)功能熒光檢測試劑盒20
聚酰胺粉(柱層析用) Polyamide 質(zhì)量規(guī)格:柱層析用 ELISAKitILK-1人整合素連接激酶1規(guī)格:48T/96T
聚酰胺粉(柱層析用,200-400目) Polyamide 質(zhì)量規(guī)格:柱層析用,200-400目 小鼠亮酸腦啡肽(Leu-ENK)ELISA試劑盒 ,英文名: Leu-ENK ELISA Kit
HumanKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISAKit 人腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 12-Aminolauric
acid 693-57-2 中文名:12-氨基十二酸 分子式:C12H25NO2 度:98.0%
Humankappaimmunoglobulinlightchain,κ-IgLCELISAKit 人球蛋白輕鏈kappa抗體(κ-IgLC)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
1,6,2',3',6'-O-Pentaacetyl-3-O-trans-p-coumaroylsucrose 138213-63-5 中文名: 分子式:C31H38O18 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
Humanisletcellaibody,ICAELISAKit 人胰島細(xì)胞抗體(ICA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 (-)-Phaselic
acid 423170-79-0 中文名: 分子式:C13H12O8 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
Humanimmunoglubinjoiningchain,Ig-jELISAKit 人球蛋白j鏈(Ig-j)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 1,6,2',6'-O-Tetraacetyl-3-O-trans-p-coumaroylsucrose 中文名: 分子式:C29H36O17 度:95.0%
Humanimmunoglobulinheavychainvariableregion,IgHVELISAKit 人球蛋白重鏈可變區(qū)(IgHV)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 1,4-Bis[2-(4-methyl-5-phenyloxazolyl)]benzene 3073-87-8 中文名:1,4-二[2-(4-甲基-5-苯基惡唑基)]苯 分子式:C26H20N2O2 度:% 關(guān)鍵詞: