注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱 |
鹿源性成分(Deer)核酸試劑盒原理 |
英文名稱 |
詳見(jiàn)說(shuō)明 |
貨號(hào) |
BJ-R015036 |
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書(shū);陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
鹿源性成分(Deer)核酸試劑盒原理組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
兔子γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒 6-Aminoquinoxaline 中文名:6-氨基喹喔啉 分子式:C8H7N3
兔子β血小板球蛋白elisa試劑盒 兔子β血小板球蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子β血小板球蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子β血小板球蛋白試劑盒、兔子β血小板球蛋白酶elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
6-Aminoquinoxaline 6298-37-9 中文名:6-氨基喹喔啉 分子式:C8H7N3 度:98.0%
兔子β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)ELISAKit
4-Amino-N-methylbenzamide 中文名:4-氨基-N-甲基苯甲酰胺 分子式:C8H10N2O 度:98.0%
兔子α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒
6-Aminopenicillanic acid
551-16-6 中文名:6-氨基青霉烷酸 分子式:C8H12N2O3S 度:98.0%
兔子α2抗纖溶酶elisa試劑盒 兔子α2抗纖溶酶試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子α2抗纖溶酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子α2抗纖溶酶試劑盒、兔子α2抗纖溶酶elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 6-Aminonicotinic acid 3167-49-5 中文名:6-氨基煙酸 分子式:C6H6N2O2 度:98.0%
正己醇(Standard for GC,>99.5%(GC)) 1-Hexanol 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,>99.5%(GC)
Mousepulmonaryactivatioegulatedchemokine,PARCELISA試劑盒小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
正己醇(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.8%(GC)) 1-Hexanol 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.8%(GC) 小鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA 試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
十六醇(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)) 1-Hexadecanol 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC) Rat desmin (Des) ELISA Kit 大鼠結(jié)蛋白(Des)ELISA試劑盒
1,6-己二醇(standard for GC)
1,6-Hexanediol 質(zhì)量規(guī)格:standard for GC Humancardiacisoformofopni,cELISAKit 人心肌特異性肌鈣蛋白T(c)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
十七烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)) Heptadecane 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC) Humanadenosinedeaminase,ADAELISA試劑盒人腺苷脫氨酶(ADA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
三十一烷(Standard for GC≥97.0%(GC)) Hentriacontane 質(zhì)量規(guī)格:Standard
for GC≥97.0%(GC) 直腸腫瘤標(biāo)記K-ras糞便檢測(cè)突變熒光分析試劑盒50
二十六烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品, ≥99.5% (GC)) Hexacosane 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品, ≥99.5% (GC) Mousealpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit小鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2,5-己二酮(standard for GC,≥99%(GC)) 2,5-Hexanedione 質(zhì)量規(guī)格:standard
for GC,≥99%(GC) 小鼠0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(pAMPK)ELISA試劑盒 ,英文名: pAMPK ELISA Kit
2,5-己二酮(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)) 2,5-Hexanedione 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC) 大鼠抵抗素(Resistin)ELISA檢測(cè)試劑盒raesistinELISAKit 96T/48T
3',3'',5',5''-四酚酞乙酯(80%,用于顯微鏡) 3',3'',5',5''-Tetrabromophenolphthaleinethyl ester 質(zhì)量規(guī)格:80%,用于顯微鏡 人淀粉狀蛋白β(A4)前體蛋白結(jié)合家族B成員1(FE65)試劑盒 Human FE65 ELISA kit
humanphosphofructokinase-platelet,PFKPELISAKit人血小板型0酸果糖激酶(PFKP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 1,8-Bis(dimethylamino)naphtalene 中文名:1,8-雙二甲氨基萘 分子式:C14H18N2
Humanphospho-exacellularsignal-regulatedkinase,pERKELISAKit人0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 1,6-Dioxaspiro[4.5]decan-2-methanol 83015-88-7 中文名: 分子式:C9H16O3
Humanphosphoenolpyruvatecarboxykinase,PCKELISAKit人0酸烯醇式同酸羧激酶(PCK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 1,6-Anhydro-β-D-glucose 中文名:1,6-脫水-β-D-葡萄糖 分子式:C6H10O5
Humanphosphatidylserine,PSELISAKit人0脂酰絲氨酸(PS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 1,4-Bis(2-benzoxazolyl)naphthalene 5089-22-5 中文名:1,4-雙(2-苯并惡唑基)萘 分子式:C24H14N2O2
humanphosphatidylinositolaibodyIgG/IgM,PIAb-IgG/IgMELISAKit人0脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 1,3-Bis(4-aminophenoxy)benzene 中文名:1,3-雙(4-氨苯氧基)苯 分子式:C18H16N2O2