注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱： 新疆出血熱病毒(XHFV)核酸試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟

英文名稱:  詳見說明
產(chǎn)品貨號(hào)： BJ-R015023

產(chǎn)品規(guī)格： 50T

產(chǎn)品分類： 熒光-PCR法

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；

◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；

◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；

◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

實(shí)驗(yàn)過程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說明書；陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）

取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。

新疆出血熱病毒(XHFV)核酸試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。

兔子睪elisa試劑盒   兔子睪試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子睪試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子睪試劑盒、兔子睪elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  8-Azaguanine  134-58-7  中文名：8-氮雜鳥嘌呤  分子式：C4H4N6O 

兔子睪elisa試劑盒   兔子睪試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子睪試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子睪試劑盒、兔子睪elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  8-Amino-2-naphthalenesulfonic acid  119-28-8  中文名：8-氨基-2-萘磺酸  分子式：C10H9NO3S 

兔子睪(T)ELISA試劑盒              7-Amino-4-methylcoumarin  中文名：7-氨基-4-甲基  分子式：C10H9NO2 

兔子睪(T)ELISAKit     7-Chloro-1,2,3,4-tetrahydrobenzo[b]azepin-5-one  中文名：  分子式：C10H10ClNO  度：98.0%

兔子高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISAKit                 7-Benzyloxyindole  中文名：7-芐氧基吲哚  分子式：C15H13NO

Amberlite XAD7HP 離子交換樹脂(Mesh 20-60)  Amberlite® XAD7HP  質(zhì)量規(guī)格：Mesh 20-60 人上皮特異性抗原(ESA)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanepithelialspecificaigen,ESAELISAKit 96T/48T

Amberlite XAD-4 非離子型大孔樹脂(粒徑0.49 - 0.69 mm)  Amberlite XAD4  質(zhì)量規(guī)格：粒徑0.49 - 0.69 mm 大鼠胰蛋白酶(ypsin)試劑盒 Rat ypsin ELISA Kit

茴香烯(分析標(biāo)準(zhǔn)品，用于萜烯分析，≥99.5% (GC))  trans-Anethole  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品，用于萜烯分析，≥99.5% (GC) 英文名稱KeRatin,AKA抗角蛋白抗體(KeRatin,AKA)Kit規(guī)格：96T/48T

山崳酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  Behenic acid  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 父母印記(IMPRIING)基因克隆技術(shù)試劑盒5

乙基叔丁基醚(標(biāo)準(zhǔn)品)  tert-Butyl ethyl ether  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitNAP人中性粒細(xì)胞堿性0酸酶規(guī)格：48T/96T

乙酸芐酯(標(biāo)準(zhǔn)品)  Benzyl acetate  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.7%(GC 小鼠硫氧還蛋白還原酶(xR)ELISA試劑盒 ，英文名： xR ELISA Kit

芐嘧磺隆(標(biāo)準(zhǔn)品)   Bensulfuron-methyl  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA檢測(cè)試劑盒RatOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISAkit 96T/48T

草除靈(標(biāo)準(zhǔn)品)  Benazolin-ethyl ester  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5% 人丁型肝炎病毒(HDV)抗原試劑盒 Human hepatitis D virus(HDV) aigen ELISA Kit

3,4-苯并芘(標(biāo)準(zhǔn)品)  3,4-Benzopyrene  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 Ratmyelinbasicprotein,MBPELISAKit大鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1,3-丁二醇(標(biāo)準(zhǔn)品)   (±)-1,3-Butanediol  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 DNA銀染試劑盒5

Inositol   100g                 Quetiapine  111974-69-7  中文名：喹硫平  分子式：C21H25N3O2S 

Indole-3-ByicAcid(IBA)   5g  Quetiapine  中文名：喹硫平  分子式：C21H25N3O2S 

icine   100g                 3-Amino-5-phenylpyrazole  中文名：3-氨基-5-苯基吡唑  分子式：C9H9N3 

ichloroaceticAcid   500g  3-Aminoadamantan-1-ol  702-82-9  中文名：  分子式：C10H17NO 

I 型膠原 N 末端肽 (X)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  3'-Hydroxygynuramide II  中文名：  分子式：C42H83NO6  度：%