注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱 |
百日咳桿菌(BP)核酸試劑盒說明書 |
英文名稱 |
詳見說明 |
貨號 |
BJ-R014986 |
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。
百日咳桿菌(BP)核酸試劑盒說明書組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
兔子髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISAKit 9-Hydroxy-α-lapachone 22333-58-0 中文名: 分子式:C15H14O4 度:96.0% 關(guān)鍵詞: 梓樹; 萘醌; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
兔子髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
1-Actamido-3,5-dimethyladmantane
1
兔子雙氫睪elisa試劑盒 兔子雙氫睪試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子雙氫睪試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子雙氫睪試劑盒、兔子雙氫睪eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
Acetylatractylodinol 中文名:乙酰蒼術(shù)素醇 分子式:C15H12O3
兔子瘦素(LEP)ELISA試劑盒 9-Methoxy-α-lapachone 中文名: 分子式:C16H16O4 度:%
兔子瘦素(LEP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 1'-Acetonaphthone 中文名:1'-萘乙酮 分子式:C12H10O 度:98.0%
乳糖酸(>98%,BC) Lactobionic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
MousePeroxisomeProliferator-activatedreceptorγ,PPAR-γELISA試劑盒小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L-氨基酸氧化酶 L-Amino acid
oxidase >4 U/mg 質(zhì)量規(guī)格:BC 小鼠腦素(BNP)ELISA試劑盒 ,英文名: BNP ELISA Kit
L-氨基酸氧化酶 L-Amino acid
oxidase >4 U/mg 質(zhì)量規(guī)格:BC 人泛素連接酶(E3/UBPL)ELISA檢測試劑盒HumanE3/ubiquitin-proteinligase,E3/UBPLELISAKit
96T/48T
乙酸鑭五水(>99%,BR) Lanthanum (III) acetate, pentahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 大鼠胰多肽 試劑盒 Rat Pancreatic prohormone,PPY ELISA kit
L-刀豆氨酸硫酸鹽(>98%,BR)
L-Canavanine sulfate salt 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 英文名稱HumanAβ1-40proteinELISAKit人Aβ1-40蛋白規(guī)格:96T/48T
肉堿鹽酸鹽(>98%,BR) L-Carnitine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 分離溶酶體度雙酶法(COX/AP)檢測試劑盒20
肉堿鹽(>99%,BR) L-Carnitine L-tartrate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
ELISAKitMHCⅡ/HLA-Ⅱ人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類規(guī)格:48T/96T
化鉛(>98%,BR) Lead (II) iodide 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠腦脊髓炎病毒(TMEV)ELISA試劑盒
硬脂酸鉛
Lead (II) stearate 質(zhì)量規(guī)格:BR Skin reactive factor / inflammatory factor (SRF/IF)
ELISA Kit 人皮膚反應(yīng)因子/炎性因子(SRF/IF)ELISA試劑盒
硫酸鉛(>99%,BC) Lead (II) sulfate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BC Humaetinoblastomatumorsuppressorprotein,pRBELISAKit 人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
蠶多巴胺 英文名稱: Bombyx
Dopamine 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫:
DPA Methyl β-D-fructofuranoside 中文名:甲基-β-D-果糖苷 分子式:C7H14O6
菜豆凝集素elisa試劑盒 菜豆凝集素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 菜豆凝集素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:菜豆凝集素試劑盒、菜豆凝集素elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
4-Chlorodehydromethyltestosterone
2446-23-3 中文名:4-氯去氫甲基 分子式:C20H27ClO2
補(bǔ)體C4測定試劑盒(比濁法) Rifampicin 13292-46-1 中文名:利福平 分子式:C43H58N4O12
表皮生長因子受體 英文名稱: epidermal
growth factor receptor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: EGFR
3β,5α,9α-Trihydroxyergosta-7,22-dien-6-one 中文名: 分子式:C28H44O4 度:97.0%
表皮生長因子受體 英文名稱: epidermal growth factor receptor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: EGFR 3β,5α,9α-Trihydroxyergosta-7,22-dien-6-one 中文名: 分子式:C28H44O4