注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱(chēng)	草魚(yú)出血熱病毒(GCHV)核酸試劑盒說(shuō)明書(shū)
英文名稱(chēng)	詳見(jiàn)說(shuō)明
貨號(hào)	BJ-R014946

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

◇高特異性：與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng)，無(wú)非特異性擴(kuò)增；

◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；

◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；

◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

實(shí)驗(yàn)過(guò)程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書(shū)；陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取，可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）

取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。

草魚(yú)出血熱病毒(GCHV)核酸試劑盒說(shuō)明書(shū)組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。

豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)Elisa試劑盒     Amiodarone   19774-82-4  中文名：鹽酸胺酮  分子式：C25H30ClI2NO3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)ElisaKit     Alogliptin benzoate  850649-62-6  中文名：阿格列汀苯甲酸鹽  分子式：C25H27N5O4 

豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽elisa試劑盒   豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽試劑盒、豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     Amiodarone   中文名：鹽酸胺酮  分子式：C25H30ClI2NO3 

豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒     Amiodarone   19774-82-4  中文名：鹽酸胺酮  分子式：C25H30ClI2NO3 

豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISAKit     Amlodipine  中文名：氨氯地平  分子式：C20H25ClN2O5  度：98.0%

谷氨酸脫氫酶  Glutamate Dehydrogenase  質(zhì)量規(guī)格：>10 U/mg,BC 小鼠p53(p53)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousep53/tumorprotein,p53/TP53ELISAKit 96T/48T

對(duì)羥基苯三唑  HOBT, 1-Hydroxybenzotriazole  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人肥大細(xì)胞類(lèi)羧肽酶試劑盒 Human Mast Cell Carboxypeptidase ELISA Kit

亞氨基二乙酸(>98%,BR)  IDA, Iminodiacetic acid  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR RatL-Phenylalanineammonla-lyase,PALELISAKit大鼠L苯氨酸解氨酶(PAL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

DL-乳酸鋰(>98%,BR)  Lithium lactate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR CYP1A2蛋白共沉淀分析試劑盒5

堿式碳酸鎂五水(>98%,BC)  Magnesium carbonate basic pentahydrate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC Mousenicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPHELISA試劑盒小鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

二氧化錳(>97.5%,BC)  Manganese dioxide  質(zhì)量規(guī)格：>97.5%,BC 小鼠凝血因子Ⅲ(FⅢ)ELISA試劑盒 ，英文名： FⅢ ELISA Kit

1,3－二苯基脲(>98%,BR)  N,N'-Diphenylurea  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseFactorⅧ-relatedAigen,FⅧAgELISAKit 96T/48T

聚乙二醇600  PEG 600  質(zhì)量規(guī)格：BR 人非小細(xì)胞肺癌相關(guān)抗原211(CA211)試劑盒 Human cyfra211,CA211 ELISA kit

普魯士蘭(>98%,BS)  Prussian blue  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BS RatL-SelectinELISAKit大鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

派洛寧B(Ind)  Pyronin B  質(zhì)量規(guī)格：>30%,Ind Grade CYP2B1蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒25

壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體 (AIL/APO 2L )   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Arctinol B  102054-39-7  中文名：  分子式：C13H12O2S2 

壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體   英文名稱(chēng)：   tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   AIL/APO 2L  Perforatumone  827319-50-6  中文名：  分子式：C35H52O5  度：%  關(guān)鍵詞：  植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

壞死因子β   英文名稱(chēng)：   Rat Tumor Necrosis Factor β   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   TNF  β  Androst-5-ene-3β,17β-diol 3,17-diacetate  中文名：雄甾-5-烯-3β,17β-二醇 3,17-二乙酸酯  分子式：C23H34O4 

壞死因子α受體   英文名稱(chēng)：   Human Tumor Necrosis Factor α Receptor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   TNFαR  Ritonavir  155213-67-5  中文名：利托那韋  分子式：C37H48N6O5S2 

化十六烷基   100g  3-O-Benzyl estrone  中文名：3-O-芐基雌酚酮  分子式：C25H28O2  度：98.0%