注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱 |
無乳鏈球菌(StA)核酸試劑盒實驗步驟 |
英文名稱 |
詳見說明 |
貨號 |
BJ-R014935 |
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴增試劑準備(PCR前準備區(qū))
取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應管,每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。
無乳鏈球菌(StA)核酸試劑盒實驗步驟組分每頭份用量FMD RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)。
微量樣品DNA提取試劑盒 50T
Androst-2-en-17-one 中文名:5α-雄甾-2-烯-17-酮 分子式:C19H28O 度:98.0%
微量二(MDA)測定試劑盒(TBA法) Polyhydroxybutyrate 2
微量二(MDA)測定試劑盒(TBA法) Androst-5-ene-3β,17β-diol 3,17-diacetate 2099-26-5 中文名:雄甾-5-烯-3β,17β-二醇 3,17-二乙酸酯 分子式:C23H34O4 度:98.0% 關鍵詞:
微量DNA凝膠回收試劑盒 50T
Androst-5-en-3-ol-7,17-dione acetate
1449-61-2 中文名:7-酮基去氫表雄酮醋酸酯 分子式:C21H28O4 度:98.0% 關鍵詞:
微晶纖維素 50g Androst-2-en-17-one 963-75-7 中文名:5α-雄甾-2-烯-17-酮 分子式:C19H28O 度:98.0% 關鍵詞:
二氫鈉一水(ACS級) phosphate, monobasic, monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:ACS級,>98.5% MouseN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISA試劑盒小鼠N-乙?;?span lang="EN-US">-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
葡萄糖酸鈣
Calcium gluconate, hydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99% 小鼠凝血因子VIIIa輕鏈(F8aLC)ELISA試劑盒 ,英文名: F8aLC ELISA Kit
十二烷基-β-D-麥芽糖苷;月桂酰基麥芽糖苷
N-Dodecyl-b-maltoside 質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學級 小鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA檢測試劑盒Mouse6-keto-prostaglandin,6-K-PGELISAKit 96T/48T
鹽酸氨基脲
Aminourea 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人肺耐藥蛋白(LRP)試劑盒 Human LRP ELISA Kit
硫酸鏈霉素溶液,30 mg/ml
Streptomycin sulfate solution, 30 mg/ml 質(zhì)量規(guī)格:Sterile溶液,30mg/ml
Ratleukemiainhibitoryfactor,LIFELISAKit大鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
乙酰胺
Acetamide 質(zhì)量規(guī)格:>98% Cr.NeoformansRFLP基因分析試劑盒20
萘乙酰胺(AR)
1-Naphthylacetamide 質(zhì)量規(guī)格:AR,>98% MouseNeonatalThyroxine,NN-T4ELISA試劑盒小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鐵屑(>98%,BC) Iron granules 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC 小鼠凝血因子Ⅻ(FⅫ)ELISA試劑盒 ,英文名: FⅫ ELISA Kit
檸檬酸鐵(>98%,BR) Iron(III) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA檢測試劑盒Mousebrain-gpeptides,BGP/GehrelinElisakit
96T/48T
DL-乳酸(85~90%,BR) DL-Lactic acid 質(zhì)量規(guī)格:85~90%,BR 人肺表面活性物質(zhì)相關蛋白C(SP-C)試劑盒 Human SP-C ELISA Kit
抗** (AVP) 作用:
ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Oxiracetam
62613-82-5 中文名:奧拉西坦 分子式:C6H10N2O3
抗蛋白酶
250mg Valnemulin 133868-46-9 中文名:鹽酸沃尼妙林 分子式:C31H53ClN2O5S 度:98.0%
抗Livin 抗體 英文名稱: Ailivin aibody 英文縮寫: ALA 規(guī)格: 48T/96T Valsartan
137862-53-4 中文名:纈沙坦 分子式:C24H29N5O3
荊豆凝集素elisa試劑盒 荊豆凝集素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 荊豆凝集素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:荊豆凝集素試劑盒、荊豆凝集素elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
6-Aminoindole 中文名:6-氨基吲哚 分子式:C8H8N2
金黃色葡萄球菌(SA)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T Topiramate 97240-79-4 中文名:托吡酯 分子式:C12H21NO8S 度:98.0% 關鍵詞: