注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱 |
羊衣原體說明書 |
英文名稱 |
詳見說明 |
貨號(hào) |
BJ-R014910 |
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
羊衣原體說明書組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
小鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
Exemestane 107868-30-4 中文名:依西美坦 分子式:C20H24O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISAKit Formestane 566-48-3 中文名:福美司坦 分子式:C19H26O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒 Exemestane 107868-30-4 中文名:依西美坦 分子式:C20H24O2
小鼠0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶elisa試劑盒 小鼠0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶試劑盒、小鼠0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Ethyl2-((tert-butoxycarbonyl)amino)-3-nitrobenzoate 中文名: 分子式:C14H18N2O6
小鼠0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISAKit Ethyl β-D-fructofuranoside 中文名:乙基-β-D-果糖苷 分子式:C8H16O6
3,4,5-三咖啡酰奎寧酸(標(biāo)準(zhǔn)品)
3,4,5-Tricaffeoylquinic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousemaixmetalloproteinase5,MMP-5ELISAKit
96T/48T
澤瀉醇A醋酸酯 Alisol A 24-acetate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人分泌性白細(xì)胞蛋白酶抑制因子(SLPI)試劑盒 Human
secretory leukocyte protease inhibitor,SLPI ELISA Kit
澤瀉醇C-23-醋酸酯;澤瀉醇C單乙酸酯
Alisol C monoacetate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 RatIerleukin9,IL-9ELISAKit大鼠白介素9(IL-9)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
香紫蘇內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Sclareolide 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 CDK4蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒25
香紫蘇內(nèi)酯
Sclareolide 質(zhì)量規(guī)格:GC≥98%,BR MouseMelatonin,MTELISA試劑盒小鼠褪黑素(MT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
桃葉珊瑚苷
Aucubin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠前膠原C端蛋白酶增強(qiáng)子1(E1)ELISA試劑盒 ,英文名: E1 ELISA Kit
甲硝唑
Metronidazole 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 人維生素A(VA)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanVitaminA,VAELISAKit 96T/48T
甲硝唑(標(biāo)準(zhǔn)品) Metronidazole 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RAES/CCL5)試劑盒 Rat RAES
ELISA kit
乙酰哈巴苷
8-O-Acetylharpagide 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱HumanPICPELISAKit人I型前膠原羧基端肽(PICP)規(guī)格:96T/48T
黃決明素 Chrysoobtusin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 動(dòng)物組織氫ATP酶(H+-ATPase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20
人0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISAKit 2-Iodo-3-oxo-4-azaandrostane-17-carboxylic
acid 中文名: 分子式:C19H28INO3
人 Salusin- a ( Salusin- a ) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
Paris Saponin VII 中文名:重樓皂苷VII 分子式:C51H82O21
人 IP-10(IP-10) 作用: ELISA 規(guī)格:
48T/96T 進(jìn)口分裝 α-Spinasterone 中文名: 分子式:C29H46O
人 Foxp3(Foxp3) 作用: ELISA 規(guī)格:
48T/96T 進(jìn)口分裝 Atorvastatin
calcium 13
人 CXCL-11(I-TAC) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Arctinol B 中文名: 分子式:C13H12O2S2