注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱： 新孢子蟲(Ne)核酸試劑盒原理

英文名稱:  詳見說明
產(chǎn)品貨號： BJ-R014904

產(chǎn)品規(guī)格： 50T

產(chǎn)品分類： 熒光-PCR法

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；

◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；

◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測；

◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

實(shí)驗(yàn)過程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）

取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。

新孢子蟲(Ne)核酸試劑盒原理組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。

小鼠3型膠原   英文名稱：   Mouse Collagen Type 3   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   C3  Fenbendazole  43210-67-9  中文名：芬苯達(dá)唑  分子式：C15H13N3O2S 

小鼠25羥基維生素elisa試劑盒   小鼠25羥基維生素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠25羥基維生素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠25羥基維生素試劑盒、小鼠25羥基維生素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Benactyzine   中文名：鹽酸貝那替嗪  分子式：C20H26ClNO3  度：98.0%

小鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3/25HVD3)ELISA試劑盒     Benactyzine   57-37-4  中文名：鹽酸貝那替嗪  分子式：C20H26ClNO3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3/25HVD3)ELISAKit     Thevebioside  中文名：  分子式：C36H56O13  

小鼠1型前膠原羧基端原肽   英文名稱：   Mouse C-Terminal Propeptide of type I collagen    規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   PICP  N-Acetyl-L-tryptophan  中文名：N-乙酰-L-色氨酸  分子式：C13H14N2O3

防己諾林堿  Fangchinoline  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA檢測試劑盒MousesolubleE-selectin,sE-selectinELISAKit 96T/48T

澳茄新堿  Solasurine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 人附睪蛋白4(HE4)試劑盒 Human HE4 ELISA kit

五水合硫酸金雀花堿/硫酸鷹爪豆堿(標(biāo)準(zhǔn)品)  Sparteini Sulfas  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 RatIerleukin3,IL-3ELISAKit大鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

五水合硫酸金雀花堿/硫酸鷹爪豆堿  (-)-Sparteini Sulfas  質(zhì)量規(guī)格：≥97%,BR CDK2蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25

辛弗林(標(biāo)準(zhǔn)品)  Synephrine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Mousemajorhistocompatibilitycomplex-Ⅱ,MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISA試劑盒小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

辛弗林  Synephrine  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠前列腺素E受體2(EP2)ELISA試劑盒 ，英文名： EP2 ELISA Kit

辛弗林鹽酸鹽  Synephrine HCl  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 人脂聯(lián)素(ADP)ELISA檢測試劑盒Humanadiponectin,ADPELISAKit 96T/48T

三尖杉寧堿(標(biāo)準(zhǔn)品）  Cephalomannine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠脂蛋脂酶A2(Lp-PLA2)試劑盒 Rat lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PLA2 ELISA Kit

吉莫斯特;吉美嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品)  Gimeracil  質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱Humanlymphocytefunctionassociatedaigen-3ELISAKit人LFA-3(CD58)規(guī)格：96T/48T

吉莫斯特;吉美嘧啶  Gimeracil  質(zhì)量規(guī)格：>98%,二氫嘧啶脫氫酶(DPD)抑制劑 動(dòng)物組織羥脯氨酸(HYP)比色法定量檢測試劑盒20

人復(fù)合前列腺特異性抗原(CPSA)ELISAKit                 3-(tert-Butoxycarbonyl)-2,2-dimethyl-4-phenyloxazolidine-5-carboxylic acid  中文名：  分子式：C17H23NO5 

人多藥耐藥相關(guān)蛋白1(MRP1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human MRP1 (Multidrug Resistance Associated Protein 1) ELISA Kit  2-Deoxy-2,2-difluoro-D-erythro-pentafuranous-1-ulose-3,5-dibenzoate  中文名：  分子式：C19H14F2O6  度：98.0%

人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)ELISAKit     Timosaponin B-II  中文名：知母皂苷B-II  分子式：C45H76O19 

人抵抗素(Resistin)ELISAKIT     3,4-Didehydrosapriparaquione  142763-37-9  中文名：  分子式：C20H24O3 

人單皰疹病毒抗原2(HSV-Ag2)ELISAKit     3-(Hydroxymethyl)-3-nitro-1-(4-octylphenyl)-1,4-butanediol  899822-99-2  中文名：  分子式：C19H31NO5