注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱 |
貓瘟病毒(FPV)核酸試劑盒原理 |
英文名稱 |
詳見(jiàn)說(shuō)明 |
貨號(hào) |
BJ-R014900 |
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書(shū);陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
貓瘟病毒(FPV)核酸試劑盒原理組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
小鼠8異前列腺素(mouse
8-iso-PG) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
Benzyl carbamate 621-84-1 中文名:氨基甲酸芐酯 分子式:C8H9NO2
小鼠8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒
Benzidamine 中文名:鹽酸芐達(dá)明 分子式:C19H24ClN3O 度:98.0%
小鼠8異前列腺素 英文名稱: 8-isoprostane F2α 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě):
8-iso-PG
N6-Benzoyl-5'-O-(4,4'-dimethoxytrityl)-2'-deoxyadenosine 64325-78-6 中文名:N6-苯甲?;?span lang="EN-US">-5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-2'-脫氧腺苷 分子式:C38H35N5O6
小鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷elisa試劑盒 小鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷試劑盒、小鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Benzalazine 中文名:二芐肼 分子式:C14H12N2 度:98.0%
小鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷(8-OHdG)ELISA試劑盒 Benzidamine 中文名:鹽酸芐達(dá)明 分子式:C19H24ClN3O
反式玉米素
trans-Zeatin 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 英文名稱HumanOsteopoin,OPNELISAKIT人OPN規(guī)格:96T/48T
氯亞鉑酸鉀
Dipotassium tetrachloroplatinate 質(zhì)量規(guī)格:BR,鉑含量 ≥46%,原始鉑粉度>99.95% 動(dòng)物組織/ATP酶(Na+/K+-ATPase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20
環(huán)黃芪醇
Cycloastragenol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Wheatgermagglinin,WGAELISA試劑盒麥胚凝集素/凝集蛋白(WGA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
馬兜鈴酸A
Aristolochic acid A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒 ,英文名: PSA ELISA Kit
羥基茜草素/紅紫素(標(biāo)準(zhǔn)品) Purpurin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠球蛋白A(IgA)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseImmunoglobulin,IgAELISAKit
96T/48T
酸棗仁皂苷D(標(biāo)準(zhǔn)品) Jujuboside D 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人富含半胱氨酸蛋白61(Cyr61/CCN1)試劑盒 Human
Cyr61/CCN1 ELISA Kit
偽原薯蕷皂苷
Pseduoprotodioscin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 RatIerleukin21,IL-21ELISAKit大鼠白介素21(IL-21)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
氧化芍藥苷,羥基芍藥苷(標(biāo)準(zhǔn)品)
Oxypaeoniflorin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 CASPASE-9蛋白共沉淀分析試劑盒5
3-異倒捻子素
3-isomangostin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Mousemacrophageinflammatoryprotein3β,MIP-3βELISA試劑盒7規(guī)格:96T/48T
柚皮苷二氫查爾酮 Naringin dihydrochalcone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠前列腺特異性抗原(PSA)ELISA 試劑盒
人抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISAKit Timosaponin AIII 41059-79-4 中文名:知母皂苷AIII 分子式:C39H64O13 度:98.5% 關(guān)鍵詞: 知母; 螺甾烷; 甾苷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
人抗α-胞襯蛋白抗體IgGelisa試劑盒 人抗α-胞襯蛋白抗體IgG試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人抗α-胞襯蛋白抗體IgG試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人抗α-胞襯蛋白抗體IgG試劑盒、人抗α-胞襯蛋白抗體IgGeisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Aloe-emodin 中文名:蘆薈大黃素 分子式:C15H10O5
人晶體蛋白βelisa試劑盒 人晶體蛋白β試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人晶體蛋白β試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人晶體蛋白β試劑盒、人晶體蛋白βeisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Periplogenin 514-39-6 中文名:杠柳苷元 分子式:C23H34O5
人金葡菌腸elisa試劑盒 人金葡菌腸試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人金葡菌腸試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人金葡菌腸試劑盒、人金葡菌腸elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Lonidamine 50264-69-2 中文名:氯尼達(dá)明 分子式:C15H10Cl2N2O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
人解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISAKit 3-(tert-Butoxycarbonyl)-2,2-dimethyl-4-phenyloxazolidine-5-carboxylic acid 中文名: 分子式:C17H23NO5 度:98.0%