注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱： 豬圓環(huán)病毒PCR檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟

英文名稱:  詳見(jiàn)說(shuō)明
產(chǎn)品貨號(hào)： BJ-R014811

產(chǎn)品規(guī)格： 50T

產(chǎn)品分類： PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

◇高特異性：與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng)，無(wú)非特異性擴(kuò)增；

◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；

◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；

◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

實(shí)驗(yàn)過(guò)程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書；陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取，可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）

取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。

豬圓環(huán)病毒PCR檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。

小鼠促黃體**   英文名稱：   leinizing hormone   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   LH  Labetalol   32780-64-6  中文名：鹽酸拉貝洛爾  分子式：C19H25ClN2O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠促黃體elisa試劑盒   小鼠促黃體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠促黃體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠促黃體試劑盒、小鼠促黃體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Clemastine fumarate  14976-57-9  中文名：富馬酸氯馬斯汀  分子式：C25H30ClNO5  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠促黃體(LH)ELISA試劑盒              Cleroindicin C  中文名：  分子式：C8H12O3 

小鼠促黃體(LH)ELISAKit     Convallagenin B  中文名：鈴蘭皂苷元B  分子式：C27H44O6  度：97.5%

小鼠促紅細(xì)胞**素   英文名稱：   erythropoietin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   EPO  Floribundone 1  118555-84-3  中文名：  分子式：C32H22O10  度：99.0%  關(guān)鍵詞：  光葉決明; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

鹽酸米諾環(huán)素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Minocycline   質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 牛肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)試劑盒 Bovine Creatine Kinase MB Isoenzyme,CK-MB ELISA Kit

鹽酸米托蒽醌(進(jìn)分)  Mitoxantrone HCl  質(zhì)量規(guī)格：進(jìn)分sigma M6545 英文名稱HumanBonemorphogeneticprotein2ELISAKit人骨成型蛋白質(zhì)2(BMP-2)規(guī)格：96T/48T

鹽酸米托蒽醌  Mitoxantrone HCl  質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 動(dòng)物細(xì)胞/組織細(xì)胞色素C釋放凋亡檢測(cè)試劑盒10

鹽酸米托蒽醌（標(biāo)準(zhǔn)品）  Mitoxantrone HCl  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Ratsolubleierleukin-1receptorⅠ,IL-1sRⅠELISA試劑盒大鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

咪唑立賓  Mizoribine  質(zhì)量規(guī)格：>98%,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí) 小鼠死亡關(guān)聯(lián)蛋白激酶3(DAPK3)ELISA試劑盒 ，英文名： DAPK3 ELISA Kit

莫吉司坦  Moguisteine  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 豚鼠球蛋白G(IgG)ELISA檢測(cè)試劑盒GuineapigImmunoglobulinG,IgGELISAKit 96T/48T

莫吉司坦(標(biāo)準(zhǔn)品)  Moguisteine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 牛肌酸激酶同工酶BB(CK-BB)試劑盒 Bovine Creatine Kinase BB Isoenzymes,CK-BB ELISA Kit

糠酸莫米松  Mometasone furoate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP31 英文名稱HumanOsteoprotegerinELISAKIT人骨保護(hù)素(OPG)規(guī)格：96T/48T

糠酸莫米松(標(biāo)準(zhǔn)品)  Mometasone furoate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 動(dòng)物細(xì)胞/組織細(xì)胞色素C釋放凋亡檢測(cè)試劑盒10

納他霉素,匹馬霉素,那他霉素,游霉素  Natamycin,Pimaricin  質(zhì)量規(guī)格：>90%,BR Ratsolubleierleukin-1receptorⅡ,IL-1sRⅡELISA試劑盒大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

胎球蛋白 -A(Fetuin-A)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     Varenicline tartrate  375815-87-5  中文名：酒石酸伐侖克林  分子式：C17H19N3O6 

羧酸酯酶（CarE）測(cè)試盒   可見(jiàn)分光光度法   50管/48樣  4,5,6,7-Tetrahydrothieno [3,2,c]pyridine   28783-41-7  中文名：  分子式：C7H10ClNS  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

損傷分子1   英文名稱：   Human Kidney Injury Molecule 1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   KIM-1  4,4'-Dimethoxytrityl chloride  40615-36-9  中文名：4,4'-二甲氧基三苯基氯甲烷  分子式：C21H19ClO2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

髓過(guò)氧化物酶（MPO）檢測(cè)   Myeloperoxidase (MPO) detection  Rasagiline mesylate  161735-79-1  中文名：甲磺酸雷沙吉蘭  分子式：3S  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

髓過(guò)氧化物酶（MPO）測(cè)試盒   Myeloperoxidase (MPO) test kit  Ranitidine   中文名：鹽酸雷尼替丁  分子式：C13H23ClN4O3S