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產(chǎn)品中心
產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:蝦特定基因序列PCR檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟

  • 產(chǎn)品型號(hào):BJ-R014723
  • 產(chǎn)品**:邦景
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡(jiǎn)單介紹:
蝦特定基因序列PCR檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況。
詳情介紹:

產(chǎn)品特點(diǎn):

◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;

◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;

◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);

◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

參數(shù)規(guī)格:

產(chǎn)品名稱

蝦特定基因序列PCR檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟

英文名稱

詳見(jiàn)說(shuō)明

貨號(hào)

BJ-R014723

產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存:-20℃保存

產(chǎn)品有效期:一年

產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。


實(shí)驗(yàn)過(guò)程:

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)

3.10×PCR Buffer

4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5.Taq酶

二、操作步驟

1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1(10pM)               2μl

      引物2(10PM)              2μl

      Taq酶(2U/μl)            1μl

      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。

2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。

3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

使用方法:

注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理(樣本處理區(qū))

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書(shū);陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取,可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))

取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。

蝦特定基因序列PCR檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣(樣本處理區(qū))

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA試劑盒              Docosanoic acid  112-85-6  中文名:二十二烷酸  分子式:C22H44O2 

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒     D-Mannitol diacetonide  中文名:  分子式:C12H22O6  度:98.0%

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子 -1(mouse TIMP-1)   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   美國(guó) R&D  Estrone  53-16-7  中文名:雌酮  分子式:C18H22O2  度:99.0%  關(guān)鍵詞: 

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-2(mouse TIMP-2)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝  DL-Alanyl-DL-Mine  中文名:DL-丙氨酰-DL-蛋氨酸  分子式:C8H16N2O3S 

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-2   英文名稱:   Tissue inhibitors of metalloproteinases 2   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫(xiě):   TIMP-2  n-Butyl β-D-fructofuranoside  80971-60-4  中文名:基-β-D-果糖苷  分子式:C10H20O6

(Z),開(kāi)環(huán)甘遂(),,三烯,二酸 HPLC95% 20mg 牛軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)試劑盒 Bovine Cailage oligomeric maix protein,COMP ELISA kit

木蝴蝶苷A HPLC98% 20mg 英文名稱humaSIELISAKIT人甲狀腺刺激(TSI)規(guī)格:96T/48T

羥基異亮氨酸 HPLC98% 20mg 動(dòng)物二酚氧化酶(diphenolase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20

甲氧基喜樹(shù)堿 HPLC98% 20mg RatPlatelet-DerivedGrowthFactorAB,PDGF-ABELISA試劑盒大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子AB(PDGF-AB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

異烏藥內(nèi)酯 HPLC98% 20mg 小鼠外周蛋白(PRPH)ELISA試劑盒 ,英文名: PRPH ELISA Kit

靈芝酸DM HPLC95% 20mg 兔子D二聚體(D2D)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbitD-Dimer,D2DELISAKit 96T/48T

紫樹(shù)甙 HPLC95% 20mg 牛乳脂肪球EGF因子蛋白(MFGE8)試劑盒 Bovine milk fat globule-EGF factor 8 protein,MFGE8 ELISA Kit

吲哚丙烯酸甲酯 HPLC95% 20mg 英文名稱humanPTHELISAKIT人甲狀旁腺(PTH)規(guī)格:96T/48T

石杉?jí)A甲 HPLC99% 20mg 動(dòng)物肺組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10

(R)原人參二醇 HPLC98% 20mg RatPlatelet-DerivedGrowthFactorSolubleReceptorα,PDGFsR-αELISA試劑盒大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

月見(jiàn)草油 Evening primrose oil 90028-66-3 0.2ml

7,4'-二羥基皇同7,4'-twoxy7noxyflavone10mg

metxyl demetxoxycarbonylchanofricosinate 去甲氧羰基蕊木減甲酯 80151-89-9

Stearic Acid 硬脂酸標(biāo)準(zhǔn)品1957-11-4500mg硬脂酸標(biāo)準(zhǔn)品

L-天冬酸;L-Aspaic ac 56-84-8 20mg 訂購(gòu)|咨詢

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