注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格：
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產(chǎn)品名稱 |
嗜水氣單胞菌PCR檢測(cè)試劑盒原理 |
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英文名稱 |
詳見說明 |
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貨號(hào) |
BJ-R014700 |
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；
◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法：
注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）
取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
嗜水氣單胞菌PCR檢測(cè)試劑盒原理組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白-1α 英文名稱： Macrophage Inflammatory protein 1α 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫：
MIP-1α/CCL3
Edaravone 中文名：依達(dá)拉奉 分子式：C10H10N2O 度：98.0%
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白-1 英文名稱： Macrophage
Inflammatory protein 1 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： MIP-1
Emtricitabine 中文名：恩曲他濱 分子式：C8H10FN3O3S
小鼠巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)ELISA試劑盒
Eleutheroside C 15486-24-5 中文名： 分子式：C8H16O6 度：97.5% 關(guān)鍵詞： 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
小鼠巨噬細(xì)胞趨化蛋白-3 英文名稱： monocyte
chemotactic protein 3 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： MCP-3
Lapachol 84-79-7 中文名：拉帕醇 分子式： 度：98.0% 關(guān)鍵詞： ; ; 抗腫瘤; 萘醌; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
小鼠巨噬細(xì)胞趨化蛋白-1 英文名稱： monocyte chemotactic protein 1 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： MCP-1 Lapachol 中文名：拉帕醇 分子式：
原莪述烯醇 HPLC≥95% 20mg 調(diào)料D-葡萄糖酸內(nèi)脂比色法定量檢測(cè)試劑盒20
醉椒素 HPLC≥95% 20mg
RatphosphoProteinKinaseC,P-PKCELISA試劑盒大鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
，二氫甲氧醉椒素 HPLC≥95% 20mg 小鼠維生素K1(VK1)ELISA試劑盒 ，英文名： VK1 ELISA Kit
黃卡瓦胡椒素B HPLC≥95% 20mg 小鼠白細(xì)胞分化抗原30(CD30)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseClusterofdiffereiation30,CD30ELISAKit
96T/48T
,二甲氧基黃烷酮 HPLC≥95% 20mg 人含SET域4(setd4)試劑盒 human setd4 ELISA Kit
楮樹黃酮醇F HPLC≥95% 20mg
RatEndomeiumAibody,EMAbELISAKit大鼠抗內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
,'二異戊烯基金雀異黃素 HPLC≥95% 20mg 4-氨基-3-肼基-5巰基-1，2，4-三氮唑(AHMT)10克
山豆根黃烷酮A HPLC≥95% 20mg
MouseEsadiolreceptor,ERELISA試劑盒小鼠雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
龍血素D HPLC≥95% 20mg 小鼠維生素K1(VK1)ELISA 試劑盒
血竭黃烷A HPLC≥95% 20mg Rat osteocalcin / bone gla protein (OT/BGP) ELISA Kit 大鼠骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒
銀杏內(nèi)酯C Ginkgolide C (≥98%,HPLC) 15291-76-6 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品
吳茱萸Evodia raecarpa none 67879-81-6 C16H19NO3 ≥95% 果糖(F0550000
Honokiol和厚樸酚35354-74-620mg/支
羥丙基甲基纖維素標(biāo)準(zhǔn)品9004-65-3 250mg
雪松Cedrus deodara Cedrin 雪松素 75513-81-4 C16H14O8 ≥95%