注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格：
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產(chǎn)品名稱 |
人黏附分子-基因KE多態(tài)性試劑盒(PCR-RLFP)圖片 |
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英文名稱 |
詳見說明 |
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貨號 |
BJ-R014657 |
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進(jìn)行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法：
注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）
取N個（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。
人黏附分子-基因KE多態(tài)性試劑盒(PCR-RLFP)圖片組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
小鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒 Ethyl glucoside 中文名：乙基葡萄糖苷 分子式：C8H16O6
小鼠粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子 英文名稱： granulocyte-macrophage colony-stimulating
factor 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫：
GM-CSF Benzotetramisole 中文名：苯并四咪唑 分子式：C15H12N2S
小鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(mouse G-CSF) 作用： ELISA 規(guī)格：
48T/96T 進(jìn)口分裝 Ethyl
chlorogenate 中文名：綠原酸乙酯 分子式：C18H22O9 度：96.0%
小鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒 Ethyl glucoside 3198-49-0 中文名：乙基葡萄糖苷 分子式：C8H16O6 度：97.0% 關(guān)鍵詞： 抗高; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
小鼠粒細(xì)胞集落刺激因子 (mouse G-CSF) 作用： ELISA 規(guī)格：
96T 美國 R&D Malic acid 4-Me
ester 6
絲立尼亭 HPLC≥98% 20mg 小鼠細(xì)胞周期素D2(CCND2)ELISA試劑盒 ，英文名： CCND2 ELISA Kit
絡(luò)石苷元 HPLC≥98% 20mg 兔誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)ELISA檢測試劑盒Rabbitinducibleniicoxidesyhase,iNOSELISAKIT
96T/48T
細(xì)辛脂素 HPLC≥98% 20mg 牛(NO)試劑盒 Bovine Niic Oxide,NO ELISA Kit
款冬酮 HPLC≥98% 20mg 英文名稱HumanG-CSFELISAKit人粒細(xì)胞克隆刺激因子(G-CSF)規(guī)格：96T/48T
山麥冬皂苷B HPLC≥95% 20mg 蛋類總?cè)樗岜壬ǘ繖z測試劑盒20
波棱酮 HPLC≥95% 20mg
Ratnicotinicacetylcholinereceptor,N-AChRELISA試劑盒大鼠型乙酰膽堿受體(N-AChR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
羥基葛根素 HPLC≥98% 20mg 小鼠細(xì)胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒 ，英文名： Cyclin-D1 ELISA Kit
短葶山麥冬皂苷C HPLC≥95% 20mg 小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA檢測試劑盒MouseMucin-5subtypeAC,MUC5ACELISAKit 96T/48T
單葡萄糖醛酸甘草酸 HPLC≥98% 20mg 人黑色素瘤試劑盒 Human melanoma ELISA Kit
甲氧基betaD吡喃葡萄糖苷 HPLC≥98% 20mg RatCyclosporineA,CsAELISAKit大鼠環(huán)孢素A(CsA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
益智(益智仁)
Galangal(Alpinia oxyphylla) 1g
人參皂甙RdGinsqnosidqRd2702-93-8HPLC≥98%，20mg/vial
高效瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒 暫不提供 暫不提供 暫不提供 50次，100次
絡(luò)塞琳84954-93-8Rowenin
三七素 Dencichine 5302-45-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定