注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱	人CYP基因多態(tài)性試劑盒(PCR-RLFP)原理
英文名稱	詳見說明
貨號	BJ-R014636

產(chǎn)品運輸：低溫運輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點：

◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴增；

◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；

◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；

◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

實驗過程：

一、試劑準備

1. DNA模板

2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。

2. 擴增試劑準備（PCR前準備區(qū)）

取N個（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。

人CYP基因多態(tài)性試劑盒(PCR-RLFP)原理組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)。

小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒     Fmoc-O-(benzylphospho)-L-threonine  中文名：Fmoc-蘇氨酸磷酸芐酯  分子式：C26H26NO8P 

小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體(mouse uPA-R)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  Miconazole nitrate  22832-87-7  中文名：硝酸咪康唑  分子式：C18H15Cl4N3O4  度：98.0%   

小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體   英文名稱：   urokinase-plasmingen activator receptor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   uPA-R  Fluoronaphthalene  中文名：  分子式：C10H7F  度：98.0%

小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒     Fmoc-O-(benzylphospho)-L-threonine  175291-56-2  中文名：Fmoc-蘇氨酸磷酸芐酯  分子式：C26H26NO8P  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(mouse uPA)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  Miconazole nitrate  中文名：硝酸咪康唑  分子式：C18H15Cl4N3O4

,,,四甲氧基 HPLC≥98% 5mg 蛋白樣品樹脂法去內(nèi)試劑盒20

,二甲氧基 HPLC≥98% 5mg RatMyoglobin,MYO/MBELISA試劑盒大鼠肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

,二乙酰氧基黃酮 HPLC≥98% 5mg 小鼠線粒體乙脫氫酶(ALDM)ELISA試劑盒 ，英文名： ALDM ELISA Kit

ObetaD吡喃葡萄糖苷芹菜甙元 HPLC≥98% 5mg 兔細胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISA檢測試劑盒Rabbitlymphocytefunctionassociatedaigen3,LFA-3ELISAKit 96T/48T

二十三基,苯二醇 HPLC≥98% 5mg 牛誘導型合成酶(iNOS)試劑盒 Bovine Inducible Niic Oxide Syhase,iNOS ELISA Kit

羥基,二甲氧基黃酮 HPLC≥98% 5mg 英文名稱HumanEndostatinELISAKit人內(nèi)皮抑素(Endostatin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

羥基甲氧基鐵屎米酮 HPLC≥98% 5mg 蛋白樣品液相法去內(nèi)試劑盒20

羥基乙酰氧基甲氧基黃酮 HPLC≥98% 5mg RatMyosin,MYSELISA試劑盒大鼠肌球蛋白(MYS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

羥基乙酰氧基黃酮 HPLC≥98% 5mg 小鼠線粒體解偶聯(lián)蛋白1(UCP1)ELISA試劑盒 ，英文名： UCP1 ELISA Kit

乙酰氧基羥基黃酮 HPLC≥98% 5mg 兔子主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHCⅢ/RLAⅢ)ELISA檢測試劑盒RabbitmajorhistocompatibilitycomplexⅢ,MHCⅢ/RLAⅢELISAKit 96T/48T

異鼠李素-3-O-新橙皮苷 55033-90-4 檢測用對照品 異鼠李素-3-O-新橙皮糖苷

紫草 Arnepia Root 紫草青苷 63492-69-3 C14H19NO8 ≥98% (克死螨

對照品補骨脂素110739-200511含量測定

Clobetasol Propionate錄倍他索標準品25122-46-7200mg錄倍他索標準品

水蓼Polygonum xy7nopiper Drim-7-ene-11,12-diol eetonide (7aS,11aS,11bR)-1,5,7,7a,8,9,10,11,11a,11b-十氫-3,3,8,8,11a-五甲基并[1,2-e][1,3]二氧雜卓 213552-47-7 C18H30O2 ≥98%