注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格：
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產(chǎn)品名稱 |
犬鉤端螺旋體PCR檢測試劑盒實驗步驟 |
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英文名稱 |
詳見說明 |
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貨號 |
BJ-R014631 |
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法：
注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。
2. 擴增試劑準備（PCR前準備區(qū)）
取N個（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。
犬鉤端螺旋體PCR檢測試劑盒實驗步驟組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)。
小鼠凝血因子X(mouse FX) 作用： ELISA 規(guī)格：
48T/96T 進口分裝
Menthyl-5-(4-amino-2-oxo-2H-pyrimidin-1-yl)-[1,3]oxathiolane-2-carboxylic
acid 14
小鼠凝血因子X 英文名稱： blood
coagulation factor X 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： FX
Nandrolone laurate
26490-31-3 中文名：月桂酸諾龍 分子式：C30H48O3 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
小鼠凝血因子elisa試劑盒 小鼠凝血因子試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠凝血因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠凝血因子試劑盒、小鼠凝血因子elisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
Ganciclovir 82410-32-0 中文名：更昔洛韋 分子式：C9H13N5O4
小鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA試劑盒
Furosemide 54-31-9 中文名： 分子式：C12H11ClN2O5S
小鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISAKit Clorofene 中文名：4-氯-2-芐基苯酚 分子式：C13H11ClO
異海松烯,二醇 HPLC≥98% 5mg 人紅細胞原卟啉(EP)試劑盒 Human
erythrocyte protoporphyrin,EP ELISA Kit
貝殼杉烯,,三醇 HPLC≥98% 5mg Ratcross-linkedC-telopeptidesofTypeⅠcollagen,CⅠCPELISAKit大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
羥基漿果赤霉素 III HPLC≥98% 5mg 20毫升玻璃勻漿器1個
甲氧基羰基beta咔啉 HPLC≥98% 5mg MouseCyclin-D3ELISA試劑盒小鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
脫羧氧代茶酸 HPLC≥98% 5mg 小鼠硝基酪酸()ELISA試劑盒 ，英文名：
ELISA Kit
乙?；淙f壽局素 A HPLC≥98% 5mg 兔半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA檢測試劑盒RabbitCystatinC,Cys-CELISAKit
96T/48T
,貝殼杉烷二醇 HPLC≥98% 5mg 牛脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)試劑盒 Bovine lipopolysaccharide binding protein,LBP ELISA
kit
,,三羥基齊墩果烯酸 HPLC≥98% 5mg 英文名稱HumanBrainderivedneuroophicfacorELISAKit人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISAKit規(guī)格：96T/48T
,,三鄰甲基鞣花酸 HPLC≥98% 5mg 蛋白樣品賴氨酸層析法去內(nèi)試劑盒20
,脫氫維酮 HPLC≥98% 5mg Ratmyelinbasicprotein,MBPELISA試劑盒大鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
異鼠李素 Isorhamnetin (≥98%,HPLC) 480-19-3 20MG 標準品
喜樹Camptotheca acuminata none 61186-24-1
C25H30O13 ≥95% 格列本脲 雜質(zhì)B(Y0000242
Asiaticoside積雪草苷16830-15-2亞細亞皂苷20mg/支
Zileon Related
Compound B齊留通相關(guān)物質(zhì)B標準品50mg
白屈菜 Chelidonium majus L. Chelerythrine chloride 鹽酸白屈菜紅堿 3895-92-9 C21H18ClNO4 ≥98%