產(chǎn)品特點(diǎn)：

◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；

◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；

◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；

◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

產(chǎn)品名稱： 牛海綿狀腦病毒PCR檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟

英文名稱:  詳見說明
產(chǎn)品貨號(hào)： BJ-R014599

產(chǎn)品規(guī)格： 50T

產(chǎn)品分類： PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

實(shí)驗(yàn)過程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說明書；陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）

取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。

牛海綿狀腦病毒PCR檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。

小鼠生長(zhǎng)釋放多肽(GHRP)ELISAKit     Indometacin  中文名：吲哚美辛  分子式：C19H16ClNO4  度：98.0%

小鼠生長(zhǎng)（GH）ELISA試劑盒     Irbesartan  中文名：厄貝沙坦  分子式：C25H28N6O 

小鼠生長(zhǎng)分化因子6   英文名稱：   Mouse Growth Differeiation Factor 6   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   GDF-6  Danshenxinkun A  中文名：丹參新醌甲  分子式：C18H16O4 

小鼠生長(zhǎng)分化因子3   英文名稱：   Mouse Growth Differeiation Factor 3   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   GDF3  Danshenxinkun A  中文名：丹參新醌甲  分子式：C18H16O4  度：98.0%

小鼠生長(zhǎng)分化因子15   英文名稱：   Mouse Growth Differeiation Factor 15   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   GDF-15  Dantron  117-10-2  中文名：1,8-二羥基蒽醌  分子式：C14H8O4

鄰苯二甲酸二甲酯 HPLC≥98% 5mg 蛋白電泳尼羅紅染色試劑盒20

鄰苯二甲酸二辛酯 GC≥98% 20mg Ratmaixmetalloproteinase2/GelatinaseA,MMP-2ELISA試劑盒大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

靈芝醇 B HPLC≥98% 5mg 小鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA 試劑盒

靈芝醇A HPLC≥98% 5mg Rat stem cell factor / mast cell growth factor (SCF/MGF) ELISA Kit 大鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒

靈芝醇F HPLC≥98% 5mg Humanheparansulfate,HSELISAKit 人硫酸類肝素(HS)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

靈芝馬酮 HPLC≥98% 5mg Cheraxquadricarinatuslipovitellin/vitellin,Lv/VnELISA試劑盒紅螯光殼螯蝦卵黃脂0蛋白/卵黃0蛋白(Lv/Vn)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

榴花堿 HPLC≥98% 5mg 原生質(zhì)酵母細(xì)胞轉(zhuǎn)化試劑盒20

柳匍匐苷 HPLC≥98% 5mg MouseIgMELISAKit小鼠IgMELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

柳杉二醇 HPLC≥98% 5mg 小鼠血管緊張素1-7(Ang1-7)ELISA試劑盒 ，英文名： Ang1-7 ELISA Kit

六氫姜黃素 HPLC≥98% 5mg 小鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseToll-likereceptor9,TLR-9ELISAkit 96T/48T

異茴芹內(nèi)酯 482-27-9 檢測(cè)用對(duì)照品 異茴芹素

千金子Leptochloa Beauv 千金子二萜醇 34420-19-4 C20H30O4 ≥98% 碳酸鹽中碳、氧穩(wěn)定同位素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(G04416

Procyanidin B2原B229106-49-8原矢車菊素B25mg/支

Monostearyl  馬來酸單十八酯標(biāo)準(zhǔn)品2424-62-6 100mg

云南紅豆杉Taxus yunnanensis Dixy7noconiferyl alcohol 二氫松柏醇 2305-13-7 C10H14O3 ≥95%