參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱 |
鹿特定基因序列PCR檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟 |
英文名稱 |
詳見說明 |
貨號 |
BJ-R014559 |
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實(shí)驗(yàn)過程:一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
小鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISAKit Cefotaxime 64485-93-4 中文名:頭孢噻肟鈉 分子式:C16H17N5NaO7S2
小鼠細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA試劑盒
Mecobalamin 13422-55-4 中文名:甲鈷胺 分子式:C63H91CoN13O14P
小鼠細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISAKit Cefixime 中文名:頭孢克肟 分子式:C16H15N5O7S2 度:98.0%
小鼠細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子/CD147 英文名稱:
mouse Exacellular Maix Metalloproteinase Inducer /CD147 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫:
EMMPRIN/CD147 Meclizine 中文名:鹽酸美克洛嗪 分子式:C25H29Cl3N2 度:98.0%
小鼠細(xì)胞色素氧化酶(CC0)ELISA試劑盒 Mebendazole 中文名:甲苯咪唑 分子式:C16H13N3O3 度:98.0%
L阿拉伯糖 GC≥98% 250mg 大鼠腎上腺總RNA20微克
曲酸 HPLC≥98% 20mg
RatLeinizingHormone-ReleasingHormone,LHRHELISA試劑盒大鼠黃體**素釋放(LHRH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
美托洛爾
HPLC≥98% 100mg 小鼠血漿激肽釋放酶(KLKB1)ELISA試劑盒 ,英文名: KLKB1 ELISA Kit
羥基乙酸 HPLC≥98% 20mg 小鼠能a1A受體(ADRA1A)ELISA檢測試劑盒Mouseadrenergicalpha-1Areceptor,ADRA1AELISAKit
96T/48T
七葉苷 HPLC≥98% 20mg 人基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)試劑盒 Human
Maix metalloproteinase 13,MMP-13 ELISA kit
異 HPLC≥98% 100mg
Ratcholesterolesteransferprotein,CETPELISAKit大鼠血管緊張素原(aGT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
氨力農(nóng)
HPLC≥98% 100mg 10倍PB濃縮緩沖溶液100毫升
阿維菌素 97% 100mg
Mousecholesterolesteransferprotein,CETPELISA試劑盒小鼠膽酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
拉莫三嗪
HPLC≥98% 100mg 小鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒 ,英文名: GMP-140 ELISA Kit
拉莫三嗪 HPLC≥98% 250mg 小鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA檢測試劑盒MouseDopamineD1receptor,D1RELISAKit 96T/48T
乙酰0酸二鹽 Acetyl
phosphatetwolitxium salts 0.3g/支
河速Tqodotoxin4-428-8HPLC≥99%,1mg/vial
言酸吐根減 Emetine xy7nochloride 14198-59-5 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
供檢查用二縮三190021-201001常溫,避光1ml
瓜子金皂苷V Polygalasaponin V 162857-65-0 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
鹿特定基因序列PCR檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研