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產(chǎn)品中心
產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:鹿特定基因序列PCR檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟

  • 產(chǎn)品型號:BJ-R014559
  • 產(chǎn)品**:邦景
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
鹿特定基因序列PCR檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟可以檢測組織、細(xì)胞、血液等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況。
詳情介紹:

參數(shù)規(guī)格:

產(chǎn)品名稱

鹿特定基因序列PCR檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟

英文名稱

詳見說明

貨號

BJ-R014559

產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存:-20℃保存

產(chǎn)品有效期:一年

產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。


產(chǎn)品特點(diǎn):

◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;

◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;

◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;

◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

實(shí)驗(yàn)過程:

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)

3.10×PCR Buffer

4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5.Taq酶

二、操作步驟

1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1(10pM)               2μl

      引物2(10PM)              2μl

      Taq酶(2U/μl)            1μl

      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。

2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。

3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

使用方法:

注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理(樣本處理區(qū))

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))

取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。

組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣(樣本處理區(qū))

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。

小鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISAKit     Cefotaxime   64485-93-4  中文名:頭孢噻肟鈉  分子式:C16H17N5NaO7S2 

小鼠細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA試劑盒              Mecobalamin  13422-55-4  中文名:甲鈷胺  分子式:C63H91CoN13O14P 

小鼠細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISAKit     Cefixime  中文名:頭孢克肟  分子式:C16H15N5O7S2  度:98.0%

小鼠細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子/CD147   英文名稱:   mouse Exacellular Maix Metalloproteinase Inducer /CD147   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   EMMPRIN/CD147  Meclizine   中文名:鹽酸美克洛嗪  分子式:C25H29Cl3N2  度:98.0%

小鼠細(xì)胞色素氧化酶(CC0ELISA試劑盒     Mebendazole  中文名:甲苯咪唑  分子式:C16H13N3O3  度:98.0%

L阿拉伯糖 GC98% 250mg 大鼠腎上腺總RNA20微克

曲酸 HPLC98% 20mg RatLeinizingHormone-ReleasingHormone,LHRHELISA試劑盒大鼠黃體**素釋放(LHRH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

美托洛爾  HPLC98% 100mg 小鼠血漿激肽釋放酶(KLKB1)ELISA試劑盒 ,英文名: KLKB1 ELISA Kit

羥基乙酸 HPLC98% 20mg 小鼠能a1A受體(ADRA1A)ELISA檢測試劑盒Mouseadrenergicalpha-1Areceptor,ADRA1AELISAKit 96T/48T

七葉苷 HPLC98% 20mg 人基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)試劑盒 Human Maix metalloproteinase 13,MMP-13 ELISA kit

HPLC98% 100mg Ratcholesterolesteransferprotein,CETPELISAKit大鼠血管緊張素原(aGT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

氨力農(nóng)  HPLC98% 100mg 10PB濃縮緩沖溶液100毫升

阿維菌素 97% 100mg Mousecholesterolesteransferprotein,CETPELISA試劑盒小鼠膽酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

拉莫三嗪  HPLC98% 100mg 小鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒 ,英文名: GMP-140 ELISA Kit

拉莫三嗪  HPLC98% 250mg 小鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA檢測試劑盒MouseDopamineD1receptor,D1RELISAKit 96T/48T

乙酰0酸二鹽 Acetyl phosphatetwolitxium salts 0.3g/

河速Tqodotoxin4-428-8HPLC99%,1mg/vial

言酸吐根減 Emetine xy7nochloride 14198-59-5 20mg HPLC98% 用于含量測定

供檢查用二縮三190021-201001常溫,避光1ml

瓜子金皂苷V Polygalasaponin V 162857-65-0 20mg HPLC98% 用于含量測定

鹿特定基因序列PCR檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

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