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產(chǎn)品中心
產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:柯薩奇病毒PCR檢測試劑盒原理

  • 產(chǎn)品型號:BJ-R014532
  • 產(chǎn)品**:邦景
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
柯薩奇病毒PCR檢測試劑盒原理可以檢測組織、細(xì)胞、血液等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況。
詳情介紹:

產(chǎn)品特點(diǎn):

◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;

◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;

◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測;

◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

參數(shù)規(guī)格:

產(chǎn)品名稱

柯薩奇病毒PCR檢測試劑盒原理

英文名稱

詳見說明

貨號

BJ-R014532

產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存:-20℃保存

產(chǎn)品有效期:一年

產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。


實(shí)驗(yàn)過程:

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)

3.10×PCR Buffer

4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5.Taq酶

二、操作步驟

1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1(10pM)               2μl

      引物2(10PM)              2μl

      Taq酶(2U/μl)            1μl

      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。

2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。

3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

使用方法:

注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理(樣本處理區(qū))

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))

取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。

柯薩奇病毒PCR檢測試劑盒原理組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣(樣本處理區(qū))

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。

小鼠性血友病因子(mouse VWF)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝  Methylprednisolone  中文名:甲基潑尼松龍  分子式:C22H30O5  度:98.0%

小鼠性血友病因子   英文名稱:   von Willebrand Factor   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   VWF  Methyl β-D-fructofuranoside  中文名:甲基-β-D-果糖苷  分子式:C7H14O6  度:%

小鼠細(xì)胞粘附分子-1(mouse sVCAM-1)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝     Miconazole nitrate  22832-87-7  中文名:硝酸咪康唑  分子式:C18H15Cl4N3O4 

小鼠細(xì)胞粘附分子-1   英文名稱:   vascuiar endothelial cells adhesion molecule 1   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   VCAM-1  Fluoronaphthalene  321-38-0  中文名:  分子式:C10H7F 

小鼠細(xì)胞粘附分子 -1 (mouse VCAM-1)   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   美國 R&D  Ethyl 2-(3-cyano-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-1,3-thiazole-5-carboxylate  中文名:  分子式:C14H12N2O3S

Alpha軟脂酸香樹精酯 HPLC98% 20mg 小鼠血小板衍生生長因子C(PDGFC)ELISA試劑盒 ,英文名: PDGFC ELISA Kit

Alvocidib HPLC98% 20mg 兔子(T)ELISA檢測試劑盒rabbitTestoterone,TELISAKit 96T/48T

Bevirimat HPLC98% 20mg 犬白介素7受體(IL7R)試劑盒 Dog ierleukin 7 receptor,IL7R ELISA kit

BMS HPLC98% 20mg 英文名稱HuamnMBPELISAKit人髓0脂堿蛋白(MBP)規(guī)格:96T/48T

Celgosivir HPLC98% 20mg 大鼠ERβ基因甲基化檢測試劑盒20

Cimiracemoside D HPLC98% 20mg RatLeukoieneB4,LT-B4ELISA試劑盒大鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

cis紫莖女貞苷B HPLC98% 10mg 小鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)ELISA試劑盒 ,英文名: PDGF-BB ELISA Kit

D()奎寧酸 GC98% 20mg 小鼠胃蛋白酶(Pepsin)ELISA檢測試劑盒MousePepsinELISAKit 96T/48T

D(+)木糖 HPLC99% 20mg 人敏感性脂肪酶(HSL)試劑盒 Human hormone sensitive lipase,HSL ELISA Kit

D(+)蘋果酸 HPLC90% 20mg Ratcalcium/calmodulin-dependeproteinkinase-,CAMK2ELISAKit大鼠鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2(CAMK2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

依諾肝素分子量校準(zhǔn)B標(biāo)準(zhǔn)品(易潮解,避光),(+4,+4)... 6mg

蓬莪術(shù)Curcuma zedoaria none 20013-76-7 C15H14O 95% RUSCOSAPONIN B(P18175

對照品鄰磺酰胺0038-9802檢查

磺胺熔點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)物標(biāo)準(zhǔn)品63-74-1 500mg磺胺熔點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)物標(biāo)準(zhǔn)品

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