注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱 |
解脲支原體PCR檢測試劑盒實驗步驟 |
英文名稱 |
詳見說明 |
貨號 |
BJ-R014519 |
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴增試劑準備(PCR前準備區(qū))
取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應管,每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。
解脲支原體PCR檢測試劑盒實驗步驟組分每頭份用量FMD RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)。
小鼠血小板膜糖蛋白elisa試劑盒 小鼠血小板膜糖蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠血小板膜糖蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠血小板膜糖蛋白試劑盒、小鼠血小板膜糖蛋白elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
N-[3-Chloro-4-(3-fluorobenzyloxy)phenyl]-6-iodoquinazolin-4-amine 中文名: 分子式:C21H14ClFIN3O
小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒
Momor-cerebroside I 60
小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISAKit Ergosterol 57-87-4 中文名:麥角甾醇 分子式:C28H44O
小鼠血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒 Momor-cerebroside I 60
小鼠血小板活化因子(PAF)ELISAKit Minocycline 中文名: 分子式:C23H28ClN3O7
,,三咖啡??鼘幩?span lang="EN-US"> HPLC≥98% 20mg 大麥葉片原生質(zhì)細胞分離試劑盒5
,,,,,’,’七甲氧基黃酮 HPLC≥98% 10mg
RatLeptieceptor,LR/Ob-RELISA試劑盒大鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
’甲氧基芹菜苷 HPLC≥98% 10mg 小鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)ELISA試劑盒 ,英文名: NADPH ELISA Kit
OαL鼠李糖(→)β葡萄糖麥冬苷元 HPLC≥98% 10mg 小鼠Ⅳ型膠原(ColⅣ)ELISA檢測試劑盒MouseCollageypeⅣ,ColⅣELISAKIT 96T/48T
O甲基沒食子酸 HPLC≥98% 20mg 人極低密度脂蛋白(VLDL)試劑盒 Human very low density lipoprotein,VLDL ELISA Kit
O沒食子酰粘酸 HPLC≥98% 20mg Ratbradykinin,BKELISAKit大鼠血管舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
β乙?;R墩果酸 HPLC≥98% 20mg
10%SDS分子生物級溶液500毫升
β乙酰氧基,甘遂二烯(R)醇 HPLC≥98% 5mg MouseBonemorphogeneticprotein6,BMP-6ELISA試劑盒小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
表齊墩果酸 HPLC≥98% 20mg 小鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)ELISA試劑盒 ,英文名: NADH ELISA Kit
表臺灣三尖杉堿 HPLC≥98% 20mg 小鼠糖皮質(zhì)受體α(GR-α)ELISA檢測試劑盒Mouseglucocoicoidreceptor-α,GR-αELISAKit 96T/48T
一葉萩堿 5610-40-2 檢測用對照品 葉底珠堿
射干Belamcanda chinensis (L.) DC 鳶尾配基 548-76-5 C18H16O8 ≥98%
CHELERYTHRINE(TODDALINE(RG0 945
對照品富馬酸福莫特羅100633-200401HPLC含量測定用
Dinoprostone地諾前列酮標準品363-24-650mg地諾前列酮標準品
藜蘆Veraum nigrum Linn. 3,4-Dimetxoxybenzoic acid 藜蘆酸 93--07-2 C9H10O4 ≥98%