注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱 |
甲乙型流感病毒聯(lián)PCR測定試劑盒圖片 |
英文名稱 |
詳見說明 |
貨號(hào) |
BJ-R014509 |
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
甲乙型流感病毒聯(lián)PCR測定試劑盒圖片組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
小鼠胰蛋白酶elisa試劑盒 小鼠胰蛋白酶試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠胰蛋白酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠胰蛋白酶試劑盒、小鼠胰蛋白酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Loroglossin 58139-22-3 中文名: 分子式:C34H46O18 度:97.0% 關(guān)鍵詞: 抗癡呆; 梧桐屬; 繡線菊屬; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
小鼠胰蛋白酶(ypsin)ELISA試劑盒
N-(Quinoxalin-2-yl)-4-(quinoxalin-2-ylamino)benzenesulfonamide NO 中文名: 分子式:C22H16N6O2S 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠胰蛋白酶(ypsin)ELISAKit Ethyl
(1-hydroxy-4-oxocyclohexa-2,5-dien-1-yl)acetate
6
小鼠葉酸elisa試劑盒 小鼠葉酸試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠葉酸試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠葉酸試劑盒、小鼠葉酸elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
N,N-Bis(2-chloroethyl)-p-sulphonamide 中文名:N,N-雙(2-氯乙基)對(duì)甲苯磺酰胺 分子式:C11H15Cl2NO2S
小鼠葉酸(FA)ELISAKit Mitiglinide calcium 145525-41-3 中文名:米格列奈鈣 分子式:C19H25NO3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
紫草酸 HPLC≥98% 20mg 飲料精氨酸(arginine)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20
紫丁香酚苷(刺五加苷B) HPLC≥98% 20mg Mouseleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISAKit小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
紫花前胡苷 HPLC≥98% 20mg 小鼠(NO)ELISA試劑盒 ,英文名: NO ELISA Kit
紫堇塊莖堿 HPLC≥98% 10mg 小鼠特異生長因子/相關(guān)因子(TSGF)ELISA檢測試劑盒MouseTumorSpecificGrowthFacter/tumorsuppliedgroupoffactor,TSGFELISAKit
96T/48T
紫菫定酚 HPLC≥98% 10mg 人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)試劑盒 human
Prostaglandin D2-methoxime,PGD2-MOX ELISA KIT
紫蓳靈 HPLC≥98% 20mg
RatBladdeumoraigen,BTAELISAKit大鼠膀胱抗原(BTA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
紫莖女貞苷A HPLC≥98% 10mg
0.1摩爾(Dichromate)500毫升
紫莖女貞苷B HPLC≥98% 10mg
MouseAzidothymidine,AZTELISA試劑盒小鼠疊氮胸苷(AZT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
紫莖女貞苷C HPLC≥98% 10mg 小鼠葉酸受體1(FOLR1)ELISA試劑盒 ,英文名: FOLR1 ELISA Kit
紫莖女貞苷D HPLC≥98% 10mg 兔子雌二醇(E2)ELISA檢測試劑盒rabbitEsadiol,E2ELISAKit 96T/48T
一類殘留溶劑-1,2-二錄標(biāo)準(zhǔn)品 1.2ml×3ampules
南三藤Dregea volubilis 苦繩甙 D 98665-65-7 C42H70O15 ≥95% 乙琥安(E2150000
對(duì)照品茶本海明100120-200403HPLC含量測定
Metoprolol
Succinate 琥珀酸美托洛爾標(biāo)準(zhǔn)品98418-47-4 200mg琥珀酸美托洛爾標(biāo)準(zhǔn)品
漿果楝Cipadessa baccifera Aglinin A none 246868-97-3 C30H50O5 ≥97.5%