注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱(chēng): 雞特定基因序列PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
英文名稱(chēng): 詳見(jiàn)說(shuō)明
產(chǎn)品貨號(hào): BJ-R014502
產(chǎn)品規(guī)格: 50T
產(chǎn)品分類(lèi): PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書(shū);陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
雞特定基因序列PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
小鼠胰島細(xì)胞抗體(ICA)ELISA試劑盒
N-[2-Isopropylthiazol-4-ylmethyl(methyl)carbamoyl]-L-valine 中文名: 分子式:C14H23N3O3S 度:98.0%
小鼠胰島細(xì)胞抗體(ICA)ELISAKit Estradiol 中文名:雌二醇 分子式:C18H24O2
小鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒
N-[2-Isopropylthiazol-4-ylmethyl(methyl)carbamoyl]-L-valine 中文名: 分子式:C14H23N3O3S
小鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISAKit Capecitabine-2',3'-cyclic carbonate 中文名:卡培他濱 分子式:C16H20FN3O7 度:98.0%
小鼠胰島素原elisa試劑盒 小鼠胰島素原試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠胰島素原試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠胰島素原試劑盒、小鼠胰島素原elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Mizolastine 108612-45-9 中文名:咪唑司汀 分子式:C24H25FN6O
遠(yuǎn)志皂苷元 HPLC≥98% 20mg 人甲狀旁腺相關(guān)蛋白(PTHrP)試劑盒 Human Parathyroid Hormone Related
Protein,PTHrP ELISA Kit
月桂氮卓酮 GC≥98% 0.1ml
RatBeta-Endorphieceptor,β-EPRELISAKit大鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
月桂烯(香葉烯) GC≥80% (HPLC≥95%) 0.5mL 石蠟切片軟骨組織染色試劑盒50
蕓苔素內(nèi)酯 HPLC≥95% 20mg
MouseAquaporin1,AQP-1ELISA試劑盒小鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
蕓香柚皮苷 HPLC≥98% 20mg 小鼠胰蛋白酶1(ypsin-1)ELISA試劑盒 ,英文名: ypsin-1 ELISA Kit
孕甾烯醇酮; HPLC≥98% 20mg 小鼠鐵蛋白(FE)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouseferritin,FEELISAKit
96T/48T
皂皮酸 HPLC≥98% 20mg 人甲狀旁腺1受體(PTH1R)試劑盒 Human
Parathyroid Pormone 1 Receptor,PTH1R ELISA Kit
澤蘭黃酮 HPLC≥98% 20mg
RatBeta-Endorphin,β-EPELISAKit大鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
澤瀉醇A HPLC≥98% 20mg
[35S]-Cys細(xì)胞代謝標(biāo)記試劑盒20
澤瀉醇A醋酸酯; HPLC≥98% 20mg MouseAquaporin2,AQP-2ELISA試劑盒小鼠水通道蛋白2(AQP-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
葉下珠 Ye Xiazhu 2g
蘆薈甙Aloin1412-73-HPLC≥98%,20mg/vial
Jaophane 2
2,5,7,8,9,14-六乙酰氧基-3-本甲酰基氧基-15-輕基-6(17),11E-風(fēng)樹(shù)屬二烯 210108-86-4
甲?;松L(zhǎng)鑒別甲?;松L(zhǎng)140657-200301-20℃,避光2mg
異土木香內(nèi)酯;異阿蘭內(nèi)酯 isoalantolactone 470-17-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定