參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱 |
登革熱病毒PCR檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟 |
英文名稱 |
詳見說明 |
貨號(hào) |
BJ-R014447 |
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實(shí)驗(yàn)過程:一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
血小板膜糖蛋白 (GP IIb/IIIa) 作用: ELISA 規(guī)格:
48T/96T 進(jìn)口分裝
Pentoxyverine 中文名:枸櫞酸噴托維林 分子式:C26H39NO10 度:98.0%
血小板活化因子受體 英文名稱: Human
Platelet Activating Factor Receptor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: PAFR
Aspergillon A 中文名: 分子式:C22H32O 度:98.0%
血小板活化因子 (PAF) 作用:
ELISA 規(guī)格: 96T 原裝進(jìn)口 Pentagalloylglucose 中文名:五沒食子酰葡萄糖 分子式:C41H32O26 度:98.0%
血小板活化因子 英文名稱: platelet
active factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: PAF
Qingyangshengenin 3-O-α-L-cymaropyranosyl-(1→4)-β-D-oleandropyranosyl-(1→4)-β-D-cymaropyranosyl-(1→4)-β-D-cymaropyranoside 180
血糖含量試劑盒 酶標(biāo)法 50管/48樣 4-(4-Aminophenyl)morpholin-3-one 438056-69-0 中文名: 分子式:C10H12N2O2
三氯蔗糖 HPLC≥98% 20mg 犬基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)試劑盒 Canine Maix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2
ELISA kit
三七素 HPLC≥98% 20mg 英文名稱HumanangiotensinogenELISAKit人血管緊張素原(aGT)規(guī)格:96T/48T
三七皂苷FC HPLC≥98% 20mg 化線粒體損傷/氧化(NAO)熒光測定試劑盒20/200
三七皂苷Fe HPLC≥98% 20mg
RatIerferonβ,IFN-β/IFNBELISA試劑盒大鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
三七皂苷Ft HPLC≥98% 20mg 小鼠原鈣黏素15(PCDH15)ELISA試劑盒 ,英文名: PCDH15 ELISA Kit
三七皂苷R HPLC≥98% 20mg 猴載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA檢測試劑盒MonkeyapoproteinB100,apo-B100ELISAKit
96T/48T
三七皂苷R(R型) HPLC≥98% 20mg 犬基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)試劑盒 Canine
Maix metalloproteinase 13,MMP-13 ELISA kit
三七皂苷R(S型) HPLC≥90% 20mg 英文名稱HumanAngiotensinIconveingenzymeELISAKit人血管緊張素I轉(zhuǎn)化酶(ACE)規(guī)格:96T/48T
三七總皂苷 HPLC≥70% 20mg 化線粒體細(xì)胞色素C氧化酶活性測定試劑盒20
三十烷醇 GC≥98% 20mg RatIerferonγ,IFN-γELISA試劑盒大鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
羊奶奶葉 Yanggrandmaleaves 5.0g
水仙苷Narcissusglycoside604-80-820mg
AlpinuMisoflavone
ALPINUMISOFLAVONE 34086-50-5
根皮苷60-81-1Phlorizin
紫菀酮 Shionone 10376-48-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定,藥理科研
登革熱病毒PCR檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研