注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱	布魯氏菌核酸熒光PCR檢測(cè)試劑盒（探針?lè)ǎ﹫D片
英文名稱	詳見說(shuō)明
貨號(hào)	BJ-R014397

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

◇高特異性：與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng)，無(wú)非特異性擴(kuò)增；

◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；

◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；

◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

實(shí)驗(yàn)過(guò)程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書；陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取，可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）

取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。

布魯氏菌核酸熒光PCR檢測(cè)試劑盒（探針?lè)ǎ﹫D片組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。

載脂蛋白D   英文名稱：   Human Apolipoprotein D   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   ApoD  Xanthinol nicotinate  中文名：煙酸占替諾  分子式：C19H26N6O6  度：98.0%

載脂蛋白B（ApoB）測(cè)定試劑盒（比濁法）  Xanthopurpurin  中文名：1,3-二羥基蒽醌  分子式：C14H8O4  度：97.0%

載脂蛋白A-I（ApoA-I）測(cè)定試劑盒（比濁法）  Xanthopurpurin  中文名：1,3-二羥基蒽醌  分子式：C14H8O4 

載脂蛋白 E(APO E)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Oxiracetam  62613-82-5  中文名：奧拉西坦  分子式：C6H10N2O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

載脂蛋白   英文名稱：   Apolipoprotein   英文縮寫：   AI   規(guī)格：   48T/96T  Valsartan  137862-53-4  中文名：纈沙坦  分子式：C24H29N5O3  度：99.0%  關(guān)鍵詞：

藜蘆胺 HPLC≥98% 10mg 人巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)試劑盒 Human MIF ELISA Kit

藜蘆醇 HPLC≥98% 20mg Ratadrenomedullin,ADMELISAKit大鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

藜蘆醛 HPLC≥98% 20mg 載玻片細(xì)胞TUBULIN蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20

藜蘆酸 HPLC≥98% 20mg Mouse50%complemehemolysis,CH50ELISA試劑盒小鼠血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

里奧林 HPLC≥98% 20mg 小鼠脂多糖(LPS)ELISA試劑盒 ，英文名： LPS ELISA Kit

利卡靈B HPLC≥98% 20mg 腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(AIL-R3)ELISA檢測(cè)試劑盒Monkeytumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,AIL-R3ELISAKit 96T/48T

利血平 HPLC≥98% 20mg 犬皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)試劑盒 Canine Coicosterone,CO ELISA Kit

櫟櫻酸 HPLC≥97.5% 20mg 英文名稱HumanProinsulinELISAKit人胰島素原(PI)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

栗精胺 HPLC≥98% 5mg 化大鼠腎上腺髓質(zhì)素(AM)基因重組表達(dá)載體(pGEFP-AM)測(cè)序引物對(duì)2OD

連翹苷 HPLC≥98% 20mg Rathiston-H2bELISA試劑盒大鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

延胡索甲素 518-69-4 檢測(cè)用對(duì)照品 無(wú)

土木香 Inula helenium L. 異土木香內(nèi)酯 470-17-7 C15 H20 O2 ≥98% CHAMISSONOLIDE(P0 89-025

對(duì)照品奈韋拉平100641-200401含量測(cè)定

Demecarium Bromide地美溴銨標(biāo)準(zhǔn)品56-94-0250mg地美溴銨標(biāo)準(zhǔn)品

雷公藤ipterygium wilfordii 3,4-Dimetxoxypxenol 3,4-二甲氧基本酚 2033-89-8 C8H10O3 ≥95%