注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格：
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產(chǎn)品名稱 |
黃熱病病毒PCR檢測試劑盒實驗步驟 |
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英文名稱 |
Yellow Fever Virus(YFV)RTPCR |
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貨號 |
BJ-R014367 |
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法：
注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。
2. 擴增試劑準備（PCR前準備區(qū)）
取N個（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應管，每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
黃熱病病毒PCR檢測試劑盒實驗步驟3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)。
中文名稱 方法 規(guī)格 Alogliptin 中文名：阿格列汀 分子式：C18H21N5O2 度：98.0%
中文名稱 方法 規(guī)格
3-(5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate
(2R,3R)-2,3-dihydroxysuccinate 中文名： 分子式：C26H31N3O8 度：98.0%
中文名稱 方法 規(guī)格
2-Benzyl-2-(dimethylamino)-4'-morpholinobutyrophenone 11
中文名稱 方法 規(guī)格 Naftifine 65473-14-5 中文名：鹽酸萘替芬 分子式：C21H22ClN
中文名稱 方法 規(guī)格 N,N'-Bis(2-hydroxyethyl)oxamide 1871-89-2 中文名：N,N'-雙(2-羥乙基)草酰胺 分子式：C6H12N2O4
谷氨酸單鈉鹽 HPLC≥98% 50mg 犬透明質(zhì)酸酶3(HAase 3)試劑盒 Canine
Hyaluronidase 3,HAase 3 ELISA Kit
骨化二醇 HPLC≥98% 20mg 英文名稱HumaumornecrosisfactorsolublereceptorⅡELISAKIT人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsRⅡ)規(guī)格：96T/48T
骨化二醇 HPLC≥98% 10mg 超氧化物歧化酶(SOD)活性酶動力比色法定量檢測試劑盒(含標準樣)50
瓜子金皂苷V HPLC≥95% 20mg
RatgranzymesA,Gzms-AELISA試劑盒大鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
瓜子金皂苷己 HPLC≥98% 20mg 小鼠周期素依賴性激酶抑制因子2A(CDKN2A)ELISA試劑盒 ，英文名： CDKN2A ELISA Kit
關(guān)附甲素 HPLC≥98% 10mg 犬雙氫(DHT)ELISA檢測試劑盒CanineDihydrotestosterone,DHTELISAKit
96T/48T
管花苷A HPLC≥98% 20mg 犬透明質(zhì)酸酶2(HAase 2)試劑盒 Canine
Hyaluronidase 2,HAase 2 ELISA Kit
光翠雀堿 HPLC≥98% 20mg 英文名稱HumaumornecrosisfactorβELISAKIT人腫瘤壞死因子β(TNFβ)規(guī)格：96T/48T
光萼野百合堿 HPLC≥98% 20mg 超氧化物歧化酶(SOD)酵母/裂解樣品制備試劑盒50
光甘草定 HPLC≥98% 20mg RatgranzymesB,Gzms-BELISA試劑盒大鼠顆粒酶B(Gzms-B)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
鴨跖草 Commelina communis 0.5g
槲皮速-3-氧葡萄糖甙Quqrcqtinglucosidq-3-oxygqn1637-2-HPLC≥98%，20mg/vial
麥冬甲基黃烷同A metxylophiopogonanone A 74805-92-8 HPLC≥98% 20mg/支
含量測定培扶沙星130459-2003012-8℃，避光100mg
羥基積雪草苷 Madecassoside 34540-22-2 20mg HPLC≥98% 用于含量測定