注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。產(chǎn)品僅用于科研

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱	霍亂弧菌型PCR檢測試劑盒實驗步驟
英文名稱	Vibrio choleraeO1PCR
貨號	BJ-R014343

產(chǎn)品運輸：低溫運輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點：

◇高特異性：與其他病毒無交叉反應，無非特異性擴增；

◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；

◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；

◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

實驗過程：

一、試劑準備

1. DNA模板

2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。

2. 擴增試劑準備（PCR前準備區(qū)）

取N個（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應管，每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。

霍亂弧菌型PCR檢測試劑盒實驗步驟組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)。

豬白介素6(IL-6)ELISAKit     Tenacigenoside A  中文名：  分子式：C35H56O12 

豬白介素-5(IL-5)ELISAKit     Stigmast-5-ene-3β,7α,16β-triol  中文名：  分子式：C29H50O3  度：93.0%

豬白介素4elisa試劑盒   豬白介素4試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬白介素4試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豬白介素4試劑盒、豬白介素4 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Sitafloxacin  中文名：西他沙星  分子式：C19H18ClF2N3O3 

豬白介素4(IL-4)ELISA試劑盒              Telmisartan tert-butyl ester  144702-26-1  中文名：  分子式：C37H38N4O2 

豬白介素4(IL-4)ELISAKit     Tenacigenoside A  920502-42-7  中文名：  分子式：C35H56O12  度：%  關(guān)鍵詞：  孕甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

大蒜素 UV≥98%（鑒別） 20mg 小鼠足盂蛋白(PCX)ELISA試劑盒 ，英文名： PCX ELISA Kit

大葉茜草素 HPLC≥98% 20mg 貓細小病毒抗體(FPV)ELISA檢測試劑盒Felisparvovirus,FPVELISAKit 96T/48T

丹參素 HPLC≥98% 20mg 犬血清淀粉樣蛋白A2(SAA2)試劑盒 Canine serum amyloid A2,SAA2 ELISA Kit

丹參素鈉 HPLC≥98% 20mg 英文名稱MouseAILR3ELISAKIT小鼠AILR3規(guī)格：96T/48T

丹參酮I HPLC≥98% 20mg 腸胃活檢螺旋桿菌(H.PYLORI)吉姆薩(GIEMSA)染色試劑盒50

丹參酮IIA HPLC≥98% 20mg RatGATAbindingprotein4,GATA4ELISA試劑盒大鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

丹參酮IIA磺酸鈉 UV≥98% 20mg 小鼠總蛋白C(TPC)ELISA試劑盒 ，英文名： TPC ELISA Kit

丹參新酮 HPLC≥98% 5mg 小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA檢測試劑盒Mouselipoproteinα,Lp-αELISAKit 96T/48T

丹酚酸A HPLC≥98% 20mg 人抗β2糖蛋白I(β2-GPI)抗體(IgM)試劑盒 Human β2-glycoprotein I(β2-GPI)aibody IgM ELISA kit

丹酚酸B HPLC≥98% 20mg rabbitTumornecrosisfactorα,TNFαELISAKit兔子壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

雪膽素甲 Hemslecina 20mg

山椒子烯醇Mountainpepperenol78804-17-810mg

Salicyl alcohol 水楊醇 32880

Calcium Levulinate (AS)乙酰鈣標準品5743-49-71g乙酰鈣標準品

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