注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱: 彎曲桿菌PCR檢測試劑盒說明書
英文名稱: Campylobacter
spp.PCR
產(chǎn)品貨號: BJ-R013422
產(chǎn)品規(guī)格: 50T
產(chǎn)品分類: PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴增試劑準備(PCR前準備區(qū))
取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。
彎曲桿菌PCR檢測試劑盒說明書組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)。
人P27蛋白PCR檢測試劑盒 人P27蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人P27蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:PCR檢測試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人P27蛋白試劑盒、人P27蛋白PCR檢測試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
Schleicheol 1 256445-66-6 中文名: 分子式:C30H52O2 度:% 關(guān)鍵詞: ; 久樹; 豆甾烷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
人H-rasELISAKit
3-(5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate
(2R,3R)-2,3-dihydroxysuccinate 中文名: 分子式:C26H31N3O8
人HA絲酸肽酶1(HA1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human HA1 (HA
Serine Peptidase 1) ELISA Kit
3,4-Dihydro-3,4-dihydroxynaphthalen-1(2H)-one 中文名: 分子式:C10H10O3
人Dickkopf1PCR檢測試劑盒 人Dickkopf 1試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人Dickkopf 1試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:PCR檢測試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人Dickkopf 1試劑盒、人Dickkopf
1 PCR檢測試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
Testosterone benzoate
2088-71-3 中文名:17-安息香酸雄烯醇酮 分子式:C26H32O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
人chemerinPCR檢測試劑盒 人chemerin試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人chemerin試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:PCR檢測試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人chemerin試劑盒、人chemerin PCR檢測試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Triethyl 77-93-0 中文名:檸檬酸三乙酯 分子式:C12H20O7 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
MUTATION
GENERATION SYSTEM KIT 10 rxns 突變
TEMPLATE
GENERATION SYSTEM II kit 20 rxns 突變
MUA TRANSPOSASE,
20 UL 4.4 ug 突變
MUA
TRANSPOSASE 22 ug 突變
FASTDIGEST ALUI 100 rxns 限制性內(nèi)切酶和克隆酶
人大腦糖原磷酸化酶(PYGB)PCR檢測試劑盒 別稱:PYGB Human PYGB(Glycogen Phosphorylase, Brain) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組PYGB濃度