注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。產品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產品名稱: 殺蠣包拉米蟲PCR檢測試劑盒說明書
英文名稱: Bonamia
exitiosusPCR
產品貨號: BJ-R013354
產品規(guī)格: 50T
產品分類: PCR檢測試劑盒
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:本產品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產品。
產品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關說明書;陽性質控品及陰性質控品無需提取,可直接使用。
2. 擴增試劑準備(PCR前準備區(qū))
取N個(N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品)PCR反應管,每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。
殺蠣包拉米蟲PCR檢測試劑盒說明書組分每頭份用量FMD RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s,轉移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質控品和陽性質控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉移至擴增區(qū)。
動物組織/細胞總RNA提取試劑盒 Animal tissue
/ cell total RNA Exaction Kit
Riligustilide 89354-45-0 中文名: 分子式:C24H28O4 度:98.0% 關鍵詞:
東方體核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
Anthraflavic acid 84-60-6 中文名:二羥蒽醌 分子式:C14H8O4
丁酰膽堿酯酶檢測
Glucose -6- phosphate dehydrogenase (G-6-PD) detection Prilocaine
1786-81-8 中文名:鹽酸丙胺卡因 分子式:C13H21ClN2O 度:98.0% 關鍵詞:
凋亡因子BAX 英文名稱:
apoptogen BAX 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: BAX
Otophylloside B 106758-54-7 中文名:青陽參苷B 分子式:C49H78O16
凋亡相關因子配體 (Fas-L) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Varenicline tartrate 375815-87-5 中文名:酒石酸伐侖克林 分子式:C17H19N3O6 度:98.0% 關鍵詞:
HPAII 5,000U (10U/ul) 限制性內切酶和克隆酶
KPNI 4,000U (10U/ul) 限制性內切酶和克隆酶
KPNI 5x4,000U (10U/ul) 限制性內切酶和克隆酶
KPNI, HC 20,000U (50U/ul) 限制性內切酶和克隆酶
KPN2I (BSPEI) 500U (10U/ul) 限制性內切酶和克隆酶
人白介素9(IL-9)PCR檢測試劑盒 別稱:IL9, HP40, P40, TCGFⅢ, TCGF3, P40 T-cell and Mast Cell Growth Factor, P40 Cytokine, T-cell Growth Factor P40 Human IL-9(Interleukin 9) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組IL-9濃度