產品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
參數(shù)規(guī)格:
產品名稱: 放線菌屬通用PCR檢測試劑盒實驗步驟
英文名稱: Actinomyces
spp.PCR
產品貨號: BJ-R013231
產品規(guī)格: 50T
產品分類: PCR檢測試劑盒
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:本產品就是根據保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產品。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。產品僅用于科研
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關說明書;陽性質控品及陰性質控品無需提取,可直接使用。
2. 擴增試劑準備(PCR前準備區(qū))
取N個(N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品)PCR反應管,每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。
放線菌屬通用PCR檢測試劑盒實驗步驟組分每頭份用量FMD RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s,轉移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質控品和陽性質控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉移至擴增區(qū)。8.PCR擴增產物;
9.PCR反應體系與反應條件。
Stigmastane-3β,5α,6β-triol 中文名:豆甾-3β,5α,6β-三醇 分子式:C29H52O3 度:96.5% 兔基質金屬蛋白9(MMP-9)PCR檢測試劑盒
7α-Hydroxysitosterol 中文名:7α-羥基谷甾醇 分子式:C29H50O2 度:95.0% 兔肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)PCR檢測試劑盒
Ecdysterone
20,22-monoacetonide 中文名: 分子式:C30H48O7 度:98.0% 兔環(huán)0酸腺苷(cAMP)PCR檢測試劑盒
Ergosta-5,24(28)-diene-3β,7α,16β-triol 中文名: 分子式:C28H46O3 度:97.5% 兔核因子κB受體活化因子配基(RANKL)PCR檢測試劑盒
Qingyangshengenin 中文名:青陽參苷元 分子式:C28H36O8 度:97.5% 兔肌紅蛋白(rabbit Myoglobin) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
RKRSRAE H1-7
FKKSFKL-NH2
YSFVHHGFFNFRVSWREMLA pTH (1-34)
(bovine)
RKRTLRRL KRELVEPLTPSGEAPNQALLR Phosphorylase Kinase β -Subunit Fragment
(420-436) VRKRTLRRL (Nle8·18,Tyr34)-pTH (1-34) amide (bovine)
Autocamtide-2 KRTLR
PKI-tide
VEGFR-KDR/Flk-1Antagonist Peptide, K237
pTH (1-34) (human)
Autocamtide-2-Related
Inhibitory Peptide Malantide pp60 c-src (521-533) pTH-Related Protein (1-16) (human, mouse,
rat) pTH (1-34) amide (human)
(Ala286)-Calmodulin-Dependent Protein Kinase II (281-302) MAPKK2 (1-16) (human,mouse, rat) pp60 c-src (521-533) (phosphorylated) pTH-Related Protein (1-34) (human, mouse, rat) Urinary Trypsin Inhibitor Fragment
人Ⅲ型前膠原羧基端原肽(PⅢCP)PCR檢測試劑盒 別稱:P3CP Human PⅢCP(Procollagen Ⅲ C-Terminal ProPeptide) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組PⅢCP濃度