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產品詳情
  • 產品名稱:黃芪PCR鑒定試劑盒

  • 產品型號:BJ-01P3912
  • 產品**:邦景
  • 產品文檔:
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簡單介紹:
黃芪PCR鑒定試劑盒保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
詳情介紹:

服務流程:公司產品僅用于科研

接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。

產品名稱:黃芪PCR鑒定試劑盒
英文名稱:Radix astragali
規(guī)格: 50次
貨號:BJ-01P3912

產品運輸:低溫運輸

產品保存:常溫

產品有效期:一年

產品特點:本產品就是根據保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產品。

組成

1 30倍濃縮洗滌液      20ml×1瓶

2 酶標試劑                 6ml×1瓶

3 酶標包被板              12孔×8條

4 樣品稀釋液              6ml×1瓶

5 顯色劑A液               6ml×1瓶  

6 顯色劑B液               6ml×1/瓶  

7 終止液                     6ml×1瓶

8 標準品                     0.5ml×1瓶

9 標準品稀釋液           1.5ml×1瓶

10 封板膜                   2張

實驗過程:

一、試劑準備

1. DNA模板

2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)

3.10×PCR Buffer

4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5.Taq酶

二、操作步驟

1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物1(10pM)               2μl

引物2(10PM)              2μl

Taq酶(2U/μl)            1μl

DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl

加ddH2O至               50 μl

視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。

2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。

3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。


黃芪PCR鑒定試劑盒操作步驟

1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照隨貨說明書中圖表在小試管中進行稀釋。

2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  

4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7.溫育:操作同3。

8.洗滌:操作同5。

9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.

10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11.測定:以空白孔調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

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