產(chǎn)品名稱:款冬花探針法PCR鑒定試劑盒
英文名稱:Flos farfarae
規(guī)格:
50次
貨號:BJ-01P3252
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:常溫
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。公司產(chǎn)品僅用于科研
組成
1 30倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶
2 酶標(biāo)試劑 6ml×1瓶
3 酶標(biāo)包被板 12孔×8條
4 樣品稀釋液 6ml×1瓶
5 顯色劑A液 6ml×1瓶
6 顯色劑B液 6ml×1/瓶
7 終止液 6ml×1瓶
8 標(biāo)準(zhǔn)品 0.5ml×1瓶
9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1瓶
10 封板膜 2張
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照隨貨說明書中圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
1-甲基萘
1-(Bromomethyl)naphthalene 質(zhì)量規(guī)格:>99%
ELISAKitHB-β人血紅蛋白β亞基規(guī)格:48T/96T
R-聯(lián)萘酚酯
(R)-(-)-1,1'-Binaphthyl-2,2'-diyl hydrogenphosphate 質(zhì)量規(guī)格:>99% 小鼠黑色素瘤(Melanoma)ELISA試劑盒 ,英文名: Melanoma ELISA
Kit
2,6-二氯嘌呤 2,6-Dichloropurine 質(zhì)量規(guī)格:>97%,原裝進(jìn)口 大鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA檢測試劑盒RatangiotensionⅠ,Ang-ⅠELISAKit 96T/48T
2,4-二氯喹唑啉
2,4-Dichloroquinazoline 質(zhì)量規(guī)格:>98% 人并殖吸蟲抗體(IgM)試劑盒 Human
Ai-Paragonimus aibody IgM ELISA kit
9-氯甲基蒽
9-(Chloromethyl)anthracene 質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)口原裝 RatoponinⅠ,Tn-ⅠELISAKit大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
阿魏酸乙酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Ethyl
ferulate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Michel固著液50毫升
CAPS; 3-(環(huán)已胺)丙磺酸 CAPS 質(zhì)量規(guī)格:>99%
PorcineEpithelialgrowthfactor,EGFELISA試劑盒豬表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
巴豆苷(標(biāo)準(zhǔn)品)
Crotonoside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠核轉(zhuǎn)錄因子kBP65(NFkBP65)ELISA試劑盒 ,英文名: NFkBP65 ELISA
Kit
巴西蘇木素(標(biāo)準(zhǔn)品) Brazilin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠細(xì)胞色素C(Cyt-C)ELISA檢測試劑盒RatCytochrome-C,Cyt-CELISAKit
96T/48T
菝葜皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)
Sarsasapogenin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人并殖吸蟲抗體(IgG)試劑盒 Human
Ai-Paragonimus aibody IgG ELISA kit
小鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Naproxen 22204-53-1 中文名:萘普生 分子式:C14H14O3
小鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISAKit
ELISA. 96T/48T Nandrolone decanoate 中文名:癸酸諾龍 分子式:C28H44O3 度:98.0%
小鼠載脂蛋白E 英文名稱: Mouse Apolipoprotein E 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ApoE
Esomeprazole 161796-78-7 中文名:埃索美拉唑鈉 分子式:C17H19N3NaO3S
小鼠載脂蛋白B 英文名稱: Mouse Apolipoprotein B 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Apo-B
Esomeprazole 161796-78-7 中文名:埃索美拉唑鈉 分子式:C17H19N3NaO3S 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠載脂蛋白AI 英文名稱: Mouse Apolipoprotein AI 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Apo-AI
Esomeprazole 中文名:埃索美拉唑鈉 分子式:C17H19N3NaO3S
102130-84-7
Nemadectin 5mg Radix stephaniae tetrandrae防已染料法PCR鑒定試劑盒
10213-78-2
Stearyldiethanolamine 100mg Radix stephaniae tetrandrae防已染料法PCR鑒定試劑盒
10213-78-2 Stearyldiethanolamine 10mM*1mLinDMSO Radix saposhnikoviae防風(fēng)染料法PCR鑒定試劑盒
1021418-53-0 RJR 2429
dihydrochloride 10mg Radix saposhnikoviae防風(fēng)染料法PCR鑒定試劑盒
1021418-53-0 RJR 2429 dihydrochloride 50mg Folium sennae 番瀉葉染料法PCR鑒定試劑盒
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
款冬花探針法PCR鑒定試劑盒DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。